M. G. Safin, B. S. Alikulov, F. A. Ruziev

 

2-AMALIY ISH: 

Mavzu: Glikogenfosforilaza  fermentini ajratish, tozalash va faolligini aniqlash 

 

Glikogenfosforilaza  fermenti  skelet  mushagida    ikki  xil  shaklda,  ya`ni 

fosforilaza-B-nofaol  va  fosforilaza-A-faol  shakllarda  uchraydi.  Fosforilaza-B  ning  

to`rtlamchi  tuzilmasi  dimer,    Fosforilaza-A  niki  esa  tetramer  bo`ladi  va  ularning 

molekulyar  massalari  o`zaro mos  holda 185000 Da va 370000  Da ga teng  bo`ladi.  

 

 

 

---

 

- 32 - 

 

 

 

Fosforilaza-B  ni  fosforilaza-A  ga  aylanishi  serin-14  qoldig`ini  fosforilaza-B-

kinaza  fermenti  ta`sirida  fosforlanishi  orqali  yuz  beradi.  Bu  ferment  yuqoridagi 

reaksiyani  katalizlaydi. 

 

 

Kerakli  reaktivlar: 

1.  1,5 mM EDTA eritmasi,  pH – 7,0; 

2.  1 n CH

3

COOH ertimasi; 

3.  KHCO

3

 quruq holda (qayta kristallangan); 

4.  (NH

4

)

2

SO

4

 xona haroratida to`yingan  eritmasi,  pH – 7,0; 

5.  1,0 mM tris-HCl  bufer eritmasi,  pH – 7,5; 

6.  2,0 M tris eritmasi; 

7.  0,3 M sisiteinning  yangi  tayyorlangan  eritmasi,  pH – 7,5; 

8.  NH

4

OH, konsentrlangan; 

9.  1,0 M Mg(CH

3

COO)

2

*4H

2

O eritmasi; 

10.  0,1 M AMF eritmasi,  pH – 7,0. 

Barcha  eritmalar  kimyoviy  toza  rusumli  reaktivlardan  tayyorlangan  bo`lishi  va 

bidistillangan  suvda tayyorlanishi  lozim.