Мирзо улуғбек номидаги

ИССЛЕДОВАНИЕ СОДЕРЖАНИЯ 18α- И 18β- ГЛИЦИРРЕТОВОЙ 
КИСЛОТЫ МЕТОДОМ ВЭЖХ 
Юлдашев Х.А., Эсанов Р.С., Файзиев Д.Д., Зиявитдинов Ж.Ф., Бабаев Б.Н.
Институт Биоорганической химиии имени академика А.С.Садыкова АН РУз 
[e-mail] 
Как известно, корень солодки голой (лакрица, лакричный корень, 
солодковый корень) (Glycyrrhyza glabra L.) — является одним из 
ценнейших лекарственных и технических растений. Он относится к 
лекарственным растениям, разрешенным к применению в медицине и 
включен во все издания Государственной Фармакопеи и фармакопеи 
многих промышленно развитых стран мира [1]. 
Широкая распространенность и неприхотливость делают это растение 
благодатным объектом для культивирования, что позволяет обеспечить 
надежную сырьевую базу [2, 3]. Плантации солодки созданы в Узбекистане 
и в соседних республиках. 
Состав корня солодки хорошо изучен, показано, что он содержит 
органические кислоты, витамин С, глюкозу, сахарозу, полисахариды, 
маннит, крахмалы, пектиновые вещества, стероиды, аспарагин, белки, 
липиды а также эфирные масла и др. [1-4]. Лекарственная ценность 
солодкового корня определяется уникальным и широким набором 
биологически активных веществ. К ним, в первую очередь, относятся 
тритерпеновые гликозиды и тритерпеноиды, фенольные соединения 
глабридин, ликвиритигенин, изоликвиритигенин и др. их гликозиды [1, 2]. 
Основной компонент глицирризиновая кислота (I) и его метаболит 
глицирретовая кислота (II) является наиболее обстоятельно изученным 
тритерпеноидом, выделенным из корня солодки [1, 3]. 
I 
II 
Глицирризиновая кислота 
Глицирретовая кислота 
Глицирретовая кислота (II) является тритерпеновой кетокислотой β-
олеаненового типа и имеет структуру 3β-гидрокси-11-оксо-18βН, 20β-
олеан-12-ен-30-овой кислоты. Обзоры химии и биологической активности 
соединений I и II, подробно рассмотрены в монографиях и обзорах [1, 2, 5, 

---

98 
6]. В частности отмечалось, что 18βН (I) отличается от своего 
структурного изомера 18αН (I) биологической активностью, некоторыми 
физико-химическими и реологическими свойствами [1]. В частности 
недавние исследования показали, что 18αН (I) имеет более высокую 
активность для лечения гепатитов и по снижению уровня ферментов 
печени [7]. При сравнительном изучении действия α и β II на 
регулирование объема клетки и процесс гемолиза человеческих 
эритроцитов было показано, что α изомер не влияет, а β-изомер II 
участвует системе управления объема клетки через блокирование ионных 
каналов в доза зависимом виде и существенно влияет на процесс гемолиза 
[8].
Учитывая, что природные источники содержат в некоторых 
количествах как -18αН (I) так и 18βН (I) изомера, нам было интересно 
исследовать количественное соотношение последних в изучаемых 
образцах, выделенных нами растительного сырья. 
I, с содержанием основного вещества 97±2% (ВЭЖХ) была получена 
из местного сырья по известной методике [9], физико-химические и 
спектральные характеристики соответствуют литературным данным. II 
была получена путём кислотного гидролиза I по известному методу [1]. 
Некоторые 
физико-химические 
параметры 
полученных 
образцов 
приведены в таблице. 
Физико-химические характеристики глицирризиновой и глицирретовой 
кислот 
№ 
Название
Брутто 
формула 
м.м. 
Т
пл
0
С 
[α]
D
25 
Rf 
-
УФ 
λ
max 
-ИК 
частоты 
колебаний 
функциональных 
групп 
1 Глицирризиновая 
кислота,
С
42
Н
62
О
16
822 Н
2
О 
222±2 
61,1±1 
С
2
Н
5
ОН 
(с 0,05) 
0,3 
хлф:эт 
254 
lgε 
4,04 
3400-3200 (ОН), 
1717 (СООН), 
1651 (СОО
-
), 1643 
(С
11
=О). 
2 
Глицирретовая 
кислота,
С
30
Н
46
О
4
470 
269±2 
165±1 
CCl
3
H 
(с 0,03) 
0,44 
аце:гекс 
254 
lgε 
3,85 
3445 (OH); 2947, 
2873 (CH
2
, СН
3
); 
1705, 
1664(С=O); 
1462 (OH). 
Масс-спектрометрию образцов проводили на приборе Q-TOF LC-MS 
Agilent Technologies серии 6520В в условиях: источник ионизации: ESI+, 
поток осушающего газа: 5 л/мин, температура осушающего газа: 300°C, 
напряжение на конусе скиммера: 65V, на фрагменторе 225V, диапазон 
масс: в режиме MS 100 – 2000 m/z. Способ ионизации: положительный. 
Образцы вводили по 5 мкл в колонку Zorbax SB C18, 3 µm, 0.5x150 мм. 
Мобильная фаза: А - 0,1% раствор муравьиный кислоты, В – ацетонитрил 

---

99 
+ 0,1 % муравьиная кислота. Элюирование осуществляли при скорости 
потока 15 мкл/мин. Градиент концентрации раствора В – минутах: 0% - 3 
мин, 60% - 23 мин, 0% - 26 мин.
В результате проведенных масс-спектрометрических анализов 
показано, что молекулярный ион образца I М
+
Н=823,4207 m/z, тогда как 
М
+
Н для II отмечен сигналом с 471,3462 m/z, что свидетельствует об 
отщепление при кислотном гидролизе диглюкуроновой части молекулы. 
ВЭЖХ проводили на приборе Agilent Technologies 1200 с DAD 
детектором и автоматическим отбором проб. Колонка: 4,6х150мм Eclipse 
XDB C18, 5 µm. Подвижная фаза: А – 0,1% водный раствор уксусной 
кислоты, В – Ацетонитрил. Градиент – 35% ацетонитрила в 
изократическом режиме. Скорость потока - 1 мл/мин. Поглощение при 
254нм, референт – 360 нм. Продолжительность анализа – 18 мин. 
В качестве стандартных образцов были использованы 18βН-
глицирризиновая кислота, α- и β-глицирретовые кислоты фирмы «Sigma», 
США. 
В результате проведенных ВЭЖХ анализов установлено, что время 
удерживания I в колонке составило 7,57 мин, тогда как α-глицирретовая 
кислота в идентичных условиях в колонке удерживается 5,90 мин, а β-
глицирретовая кислота 6,24 мин. При этом соотношение изомеров 
составляло 1:9.
Таким образом, в ходе проведенных исследований определено, что 
при 
использовании 
вышеприведенных 
методов, 
количественное 
содержание изомеров α- и β –глицирретовых кислот в образцах, 
выделенных из местного растительного сырья составляет ~10% и ~90% 
соответственно. 
Использованная литература 
1. Толстиков Г.А., Балтина Л.А., Гранкина В.П., Кондратенко Р.М., 
Толстикова Т.Г. Солодка биоразнообразие, химия, применение в 
медицине / - Новосибирск: Академическое издательство «Гео», 2007. - 
311 с. 
2. Толстиков Г.А., Балтина Л.А., Шульц Э.Э., Покровский А.Г. 
Глицирризиновая кислота // Биоорганическая химия. - Москва, 1997. - 
Т.23. - № 9. - С. 691-709. 
3. Ирисметов М.П., Джиембаев Б.Ж., Арыстанова Т.А., Барамысова Г.Т. 
Химия и применение природной глицирризиновой кислоты и ее 
производных. – Алматы. “Гылым”. 2002. – 350 с. 
4. Балтина Л. А., Кондратенко Р. М., Балтина Л. А. (мл.), Плясунова О. А., 
Покровский А. Г., Толстиков Г. А. Перспективы создания новых 
противовирусных препаратов на основе глицирризиновой кислоты и ее 
производных (ОБЗОР) //Хим.-фарм. журнал. 2009, Том 43, № 10, С. 3-12. 
5. Г. А. Толстиков, М. И. Горяев, Глицирретовая кислота, Наука, Алма-Ата 
(1966). 

---

100 
6. Г. А. Толстиков, Л. А. Балтина, Н. Г. Сердюк, Хим.-фарм. журнал, 1998, 
Т.32 №8, С. 5–14,. 
7. S. Shibata, J. Pharm. Soc. Japan, 2000, vol.120, №10, Р. 849 – 862. 
8. D.D. Fayziev, O.J. Khamidova, S.I. Rustamova, N.M. Chorieva, R.Sh. 
Kurbannazarova, P.G. Merzlyak, R.Z. Sabirov. Effect of glycyrrhizic acid and 
its aglycones on erythrocytes and tymocytes. // Актуальные проблемы 
химии природных соединений. 7-8-сентябрь 2017 г. 
9. Кондратенко Р.М., Балтина Л.А., Мустафина С.Р. Макарова Н.В, 
Насыров Х.М, Толстиков Г.А.. Способ получения кристалической 
глицирризиновой 
кислоты 
из 
промышленного 
Глицирама. 
Иммуномоделирующие свойства // Хим. -фарм. журнал. 2001. - Т.35. - 
№2. - С. 38-42.