46
Г. Определение общего холестерина в крови с использованием стан-
дартного набора реактивов Принцип метода: холестерин под действи-
ем холестеринокси-цазы в присутствии кислорода
воздуха превращается в
холестенон с высвобождением пероксида водорода. Пероксид при взаимо-
действии с 4-аминоантипирином в присутствии фенола дает соединение
красного цвета. Интенсивность развивающейся окраски пропорцио-
нальна содержанию холестерина.
Порядок выполнения работы:
В 2 пробирки (опытная и стандартная) внести по 20 капель рабочего реа-
гента. В одну пробирку (опытную) добавить 1
каплю сыворотки крови, в
другую (стандартную) - 1 каплю стандартного раствора холестерина с кон-
центрацией 2,6 ммоль/л. Оставить реакционную смесь на 20 минут при
комнатной температуре для развития окраски (или поместить на 10 минут в
термостат при 37°С).
Определить интенсивность окраски на
ФЭК-М при зеленом свето-
фильтре
(λ
= 500 нм) и толщине кюветы 3 мм. Стандартную и опытную
пробирку колориметрировать против контроля (рабочий раствор реагента).
Рассчитать концентрацию холестерина по формуле:
Содержание холестерина в норме – 2,9-5,2 ммоль/л.
Данные оформить в виде протокола, сделать вывод.
Диагностическое значение: В норме содержание
общего холестерина
составляет в среднем 2,9 - 6,5 ммоль/л в зависимости от пола, возраста, ха-
рактера питания. Из этого количества 70% составляет этерифицированный
и 30% - свободный холестерин.
47
Увеличение содержания холестерина в крови (гиперхолестеринемия)
наблюдается при атеросклерозе,
сахарном диабете, липоидном нефрозе,
микседеме,
при механической желтухе, наследственных нарушениях ли-
пидного обмена.
Гипохолестеринемия
характерна для анемии, туберкулеза, гипер-
тиреоза, голодания, раковой кахексии, паренхиматозной желтухи.
Работа 22. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ХОЛЕСТЕРИНА В ЛПВП И РАС-
Do'stlaringiz bilan baham: 
