Universum: химия и биология


Download 1.91 Mb.
Pdf ko'rish
bet31/82
Sana08.06.2023
Hajmi1.91 Mb.
#1465602
1   ...   27   28   29   30   31   32   33   34   ...   82
Bog'liq
5(107 1)

Материалы и методы 
Выделение чистых культур эндофитных бакте-
рий из корней и стеблей сои 
Для выделения эндофитных бактерий исполь-
зовали взрослое растение сою, взятое с одного из 
сельскохозяйственных полей, на которых выращи-
вается соя. 
Стебли и корень растений сои отрезали друг от 
друга и разрезали на кусочки массой 15 г, стерили-
зовали, помещая в стаканы с 99,9%-ным этанолом 
на 2 минуты и 10%-ным гипохлоритом натрия на 
1 мин [14]. После этого их помещали в стаканы со 
стерильной водой на 2 минуты. Кусочки побегов и 
корней разрезали продольно на тонкие ломтики. 
По 5 г каждого образца переносили в пробирки с 
9 мл стерильной водопроводной воды для серийного 
разведения (10
1
–10
5
). По 100 мкл суспензии из каж-
дого разведения переносили и наносили на триптонно-
соевый агар (TSA). Чашки инкубировали в термостате 
при 29°С. Через четыре дня колонии, меняющие 
цвет и форму, переносили и высевали штрихами 
на чашки с триптонно-соевым агаром для очистки. 
Чистые культуры использовали для выделения 
ДНК. Мы также проверяли наружную поверхность 
кусочков корня и побега на стерильность, помещая их 
на среду TSA и инкубируя в течение четырех суток 
при 29°С. После инкубации колоний на питательной 
среде не было, что говорит о том что снаружи растения 
были стерильны. 
Проведение скрининга эндофитных бактерий
по способности стимулировать рост растений 
Выделенные бактериальные эндофиты культи-
вировали отдельно в питательной среде в течение 
96 ч при 29°С и доводили концентрацию клеток до 
10
8
КОЕ/мл. Семена сои инокулировали бактериями 
путем замачивания в бактериальной суспензии и 
переносили в горшки со стерильной (автоклавиро-
ванной) почвой. Почву автоклавировали заранее при 
2 атм в течение 1 часа. В качестве контроля исполь-
зовали стерильную питательную среду TSA. Длину 
побегов и корней проверяли на 10-й день. Выявляли 
лучшие ростостимулирующие бактериальные изо-
ляты. 

Download 1.91 Mb.

Do'stlaringiz bilan baham:
1   ...   27   28   29   30   31   32   33   34   ...   82




Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling