«veterinariya sanitariya ekspertizasi» kafedrasi “tasdiqlayman”

Nazorat uchun savollar:

1. 
   Sut tarkibiga ammiak qayerdan keladi?
   
2. 
   Sut tarkibida ammiak qoldig‘i qancha bo‘lishiga ruhsat etiladi?
   
3. 
   Sut tarkibidagi ammiak miqdori qanday aniqlanadi
   

10-AMALIY MASHG‘ULOT
Mavzu:Veterinariya sanitariya ekspertizasi laboratoriyalarida sut tarkibidagi antibiotiklar qoldig‘ini aniqlash


Mashg‘ulotning maqsadi – talabalarga olib kelingan sut namunasi tarkibidagi antibiotiklar qoldig‘ini aniqlash usullarini o‘rgatish va laboratoriyada ketma-ketlikda bajarib, natijalari bo‘yicha olib sut namunasiga sanitariya jihatidan gigiyenik baho berish.

Rezazurin indikatori bilan inhibitiv moddalarni aniqlash usuli sutdagi inhibitiv moddalarga sezgir bo'lgan Streptococcus thermophilus mikroorganizmlari rivojlanishida rezazurin miqdorini kamaytirishga asoslangan. Bu usul sutga qo'shilgan vodorod periksni 0,01% dan ortiq dozada, formalinni 0,005% miqdorida aniqlashi mumkin; penitsillin - 0,01 IU / ml dan ortiq. Agar sutda inhibitiv moddalar bo'lmasa, rezazurin qo'shilganda rezazurin bilan bo'yalgan sut rangi saqlanib qoladi. Inhibe qiluvchi moddalar mavjud bo'lganda, sutga qo'shilgan rezazurin kamayadi va u oq rangga aylanadi.

Uskunalar, materiallar va reaktivlar
GOST 19569-89 bo'yicha tibbiy bug'li sterilizator; 30 dan 50ºC gacha haroratni nazorat qilishni ta'minlaydigan reduktor yoki suv hammomi; termostat; 0 dan 100ºC gacha bo'lgan o'lchov diapazoni bilan B tipidagi suyuq shisha termometr (simobsiz); 2-sinf aniqlikdagi laboratoriya tarozilari; balandligi 150 ± 5 mm va diametri 16 ± 1 mm bo'lgan P1 va P2 turdagi shisha sinov naychalari; pipetkalar; hajmi 200 sm3 bo'lgan o'lchov kolbalari; probirka uchun tokcha; bakteriologik halqa; konusning kauchuk vilkalari; TU 6-09-15-276-76 bo'yicha resazurin natriy tuzi; TU 49913-83 bo'yicha sutdagi inhibe qiluvchi moddalarni aniqlashni nazorat qilish uchun quruq preparat (SKIV); TU 10-02-02-789-65-91 bo'yicha inhibitiv moddalarni aniqlash uchun sinov madaniyati; distillangan suv; 2-navdan past bo'lmagan kislotaliligi 19ºT bo'lgan yog'siz sut namunalari.
Steril yog'siz sutni tayyorlash. Yog'sizlangan sut 100 sm3 yoki 10 sm3 hajmdagi shishalarga probirkalarga quyiladi va 121 ± 1 ° C da 10 daqiqa davomida sterilizatsiya qilinadi.
Rezazurinning 0,05% li suvli eritmasini tayyorlash. 200 ml qaynatilgan va sovutilgan distillangan suvda 100 mg rezazurin eritiladi. Ishchi eritma tayyorlash uchun shu eritmadan 10 ml olib, 25 ml distillangan suv qo`shing.
To'plam sinov madaniyatini tayyorlash. Tekshiriluvchi kulturaning bir halqasi 10 sm3 steril yog‘siz sut solingan probirkaga solinadi va termostatda 41±1ºC haroratda 16-18 soat davomida saqlanadi.Kultura 6±2ºC da 10-14 kun davomida saqlanadi.
Ishchi test madaniyatini tayyorlash. Sinov kulturasining bir halqasi probirkadagi 10 sm3 steril yog‘siz sutga qo‘shiladi va 100 sm3 hajmli shishaga bir tomchi yig‘ish sinov madaniyati qo‘shiladi va termostatda 41 ± 1ºC da 16-18 haroratda saqlanadi. zich pıhtı hosil bo'lguncha soat ...
Aniqlash texnikasi. Probirkaga 10 sm3 tekshiriluvchi sutdan pipetka soling. Naycha steril kauchuk tiqin bilan yopiladi. Shu bilan birga, qayta tiklangan SKIV preparati bilan nazorat tahlili o'tkaziladi. Qayta tiklangan preparatni olish uchun quruq preparat solingan shishani oching, unga 50 ± 10ºC haroratli 10 sm3 distillangan suv qo'shing, tiqin bilan yoping va to'liq eritmaguncha silkiting, so'ngra probirkaga o'tkazing. Nazorat namunasi va sinov suti bo'lgan naychalar suv hammomida 87 ± 1 ºC ga qadar isitiladi, so'ngra bu haroratda 10 daqiqa davomida inkubatsiya qilinadi va 47 ± 1 ºC ga sovutiladi. Sutga ishchi sinov kulturasi kiritiladi va preparat steril pipetka bilan probirkalarda sovutiladi: yig’ma sinov kulturasidan 0,5 sm3, bakterial preparatdan 0,3 sm3. Shlangi bilan yopilgan trubkani uch marta ag'darib, yaxshilab aralashtiramiz. Naychalar reduktorda yoki suv hammomida 46 ± 1 ºC da 1 soat 15 daqiqa davomida inkubatsiya qilinadi. Probirkalarning har biriga 1 sm3 rezazurin eritmasidan qo'shing (uning harorati 20 ± 2 ºC dan past bo'lmasligi kerak). Ikki marta teskari aylantirib, yaxshilab aralashtiring. Keyin naychalar reduktazada 10 daqiqa davomida 46 ± 1ºC da saqlanadi.
Keyin naychalar tekshiriladi. Agar sinov namunasining tarkibi po'lat ko'k, ko'k-binafsha yoki binafsha rangga bo'yalgan bo'lsa, bu sutda inhibitiv moddalar mavjudligini ko'rsatadi. Sinov va nazorat naychalarining tarkibi pushti yoki oq bo'lsa, sutda inhibitiv moddalar mavjud emas.