Аффин хромотографияси

Аффин хроматографияни ривожланиши ва принциплари
Аффин хроматография биоаффин еки биоспецифик хроматография деб юритилилиб, ушбу усул сорбент ва лиганд ўртасида боғ ҳосил қилиш ёрдамида бошқа специфик бўлган моддани тозалаб ажратиб олишга асосланган усул ҳисобланади. Аффин хроматоргафия 1940 йил Германиялик олим Штаркенштайн томонидан ишлаб чиқилган усулдир. Бунда олим ушбу усулни алфа –амилаза ферментини сувда эримайдиган субстрат, яъни крахмал ёрдамида тозалаўни ишлаб чиқади. Шундан сўнг Кемпбелл 1951 йили целлюлозага антигенни ковалент иммобиллаб антитанани тозалаш жараенини амалга оширади.
Ушбу ўтказилган тадқиқотлардан сўнг, бир неча йил ўткач 1953 йили Лерман аффин хроматография усули ёрдамида резорцин фаол моддасини тозалашни амалга оширади ва у ушбу тадқиқотларни муваффақиятли бажариб, ферментларни аффин хроматографияда тозалаш, ажратиш мумкинлигни исботлайди.
Сўнгги йилларда аффин хроматография кенг қўлланилмоқда. Бироқ, ушбу усулни амалиётда қўллаш ўзига хос қийинчилик туғдиради. Бунга сабаб, аффинант билан тозаланадиган маҳсулот ўртасида ҳосил бўладиган комплексга баъзи ташувчиларнинг кўрсатадиган таъсири билан боғлиқдир. Бунда ташувчи билан

Лиганд яъни сорбентга боғланадиган аффин лиганд ёки аффинант деб юритилади. Бордию эримайдтган аффинант тайёрлаб, ундан таркибида биологик фаол моддалар тутган эритма ўтказилса, эритма таркибидаги биологик фаол моддаларни аффинантга специфик бўлганларигина аффинант билан боғланиб, қолганлари эса колонкадан боғланмай ювилиб тушиб кетади. Аффинантга боғланган моддалар лигандни ювиш учун ишлатиладиган модда ёрдамида ювилади. Бунда специфик бўлмаган моддалар маълум буфер ёрдамида аффинантдан ажратилади. Ташувчи юзасидаги комплексни диссоциалаништга рН муҳит, ион кучи ва ҳарорат таъсир этади. Шу билан бирга ушбу жараёнда специфик агентларни ташлаш ҳам муҳим ҳисобланади. Сабаби реакцияларни амалга оширишда лиганд ва бошқа бир қатор моддалар ассосида специфик, носпецифик боғланиўлар кузатилади.

1. Боб.Аффин хроматография учун лигандларни танлаш.