Аффин хромотографияси

Лектин, Гилокапротин ва Сохаритларни ажратиш.
Лектинлпр – бу хайвон ёки ўсимлик (фитогэмоглюбинлар) табиатни оқсил ёки гликопротенлардир. Улар углевод ёки углевод гурухларига нисбатан у ёки бу даражада ўхшамасликни намоён этади. Антителаларга ухшаш бу оқсиллар хужайра лиморали кампанентлари Билан тасирланиб рак ва эмбирионал хужайралар эритроцитлар учратадиган. Ачлутентлари қандларга нисбатан спецификлика эга бўлганлиги учун натижада малиглизацияловчи ўсимта ва вируслар Билан трансфармацяланган хужайра структурасининг юзасини тадқиқ этишда фойдали бўлиши мумкин.
Лектинларни ажратиш учун сотувда бўлган плои сахарид припаратларидан булар сефадикс ва сефрозадан фойдаланилади. Хромотография 50с хароратда 0.2 М HCL кислота Билан берилгандан сўнг 3 соатдан кейин ECD –сефарозада олиб борилади. Галоктан боглар матрицасининг тўлик парчаланмасидан туриб гидролизланган натижада гемоглютинларни едицифик адсорпцияси учун зарур бўлган учкигалкатозин гурухларнинг микдорини купайишига олиб келган. 2- ацителида –N-E- аминокаприаил -2-дезонси –В-D глюкопиренозиламин Билан ковамин богланган сефарозада буғдой ўсимликларидан аплютинни ажратиш ташувчи моно сахариднинг коволент боғланиш оркали таёрланган специфик сарбент фойдаланишга мисол булади. Турли манбалардан фитогимаглиютининлар ажратиш учун катор специфик сарбентларни, N, N – метилинлаш йули оркали олишга мувофак бўлишди. Бундай усул Билан олинган гидрофил геллар кандларни Тулуб, улар уз навбатида матрицанинг алкил Билан шохлари Билан О-гликозид боғлари Билан боғланган булади.мисол сифатида О-L-L- фукапироназил хосилалари структурасининг кичик бўлагини келтирамиз .
Гликапратинларни аффин храматорграфияси учун аффин лигандлар сифатида антителалар ёки лектинлардан фойдаланилади. Иммобилланган лектинлар ёрдамида гликопротинлар ажратиш,уларнинг ички углевод колдиклари турлича афинлигини қўлашга асосланган.лектинлар ёрдамида гликопротсин ва гликопептидлари ажратишни мос келувчи усулини ишлаб чикишда крипмонсен(20)қуйдаги боскичларни таклиф етади:

-тадқиқ этилаётган модданинг углевод ва қисимида ва ички қанд ёки кандларни аниклаш;

-мувофик келувчи спесификлмкка эга бўлган лектинни танлаш.
-танланган лектинни тайёрлаш;
-эримайдиган ташувчи Билан коволент боғ хосил килиш йули Билан лектинни имобиллаш.
-имобилланган лектинда ажрашилаётган мода учун сорбциянинг оптимал шароитларни топиш.
-десорбсия шароитларни топиш.

Имобилланган лектинларда хроматография олиб боришганда ёки носпецифик элюигерлаш (рН ёки туз кансентрациясини ўзгартириш) ёки специфик усулни танлаш мумкин. Агарда гликапротинлари ички қанд ёки қандари маълум бўлса, у холда мос келувчи лектинни танлаш мумкин. Одатта лектинларни спесификлиги битта қанд Билан чегараланмайди, бироқ уларнинг спесификлиги даражасида катта фарқлар мавжуддир. Масалан Lo+us титроголовия уруғидан олинган ликтин L- фруктоза буйича мор спесификлиги Билан характерланади, бу вақитда эса conovalia ensiformis дан олинган канковилин А эса кенг спесификликка эга бўлиб, одам кони зардобининг кўпгина гликопротинларини боғлайди. Иккита имобилланган лектин яъни crotolagia juncla дан ажратиб ғолинган лектин галактоза канфигурациси учун спесификдир.( у галктоза углевод ва ликтапротаинлар Билан таъсирланади) ва кенг специфик канкавален А хам зардоб оқсилларнин ферментларида қулланрилади.

1. 
   
2.