Агзамходжаев Т. С., Хайдаров М. Б. Исмаилова М. У толипов М. Г., Бабаниязов К. К

Қон зардобида креатин(фосфо)киназа активлигини аниқлаш
Клиник лаборатор диагностикада бу метод асосан креатин (ноорганик фосфат миқдори бўйича тўпланади ) ёки креатинфосфатҳосилалари ҳисобига аниқланади .
Кинетик методлар тўғри шунингдек тескари реакцияларга асосланади, субстат сифатида креатинфосфат ва АДФ қўлланилиши билан бири иккинчисига беради.
Шунингдек Ганцер ва Гильверг усули боғланган ферментатив реакциялар тезлигини спектрофотометрик ўлчашга асосланган:
К реатин + АТФ креатинфосфат + АДФ;
креатин(фосфо)киназа
АДФ + фосфоенол-ПВК АТФ + ПВК;
пируваткиназа
П ВК + НАДН + Н⁺ лактат + НАД⁺.
лактатдегидрогеназа
Оливер спектрофотометрик методи ёрдамчи ва ииндикатор энзимларни ишлатишни ўз ичига олади:
К реатинфосфат + АДФ креатин + АТФ;
креатинфосфокиназа

А ТФ + глюкоза глюкозо-6-фосфат + АДФ;

гексокиназа
НАД⁺Ф НАДФН+Н⁺

Г люкозо-6-фосфат 6-фосфоглюконат

глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа
келтирилган схемадан кўринадики, КФК фосфат қолдиғини катализлаб, креатинфосфат ва АДФга ўтказади. Натижада кейинги реакцияда- фосфорилланган глюкоза қўлланилганда АТФ синтезланади . Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа коферменти бўлганда Глюкозо-6-фосфат НАД⁺Ф иштирокида оксидланади. НАДФН ҳосил бўлиш тезлиги λ=340 нмда креатинкиназа активлигига пропорционал.
Розальский усули , трис-буфер тайёрланганда (рН 6,8) креатинфосфат эритмасига , АДФ таркибига , магний хлорид, глюкоза, НАД⁺Ф ва АМФ, ёрдамчи ферментлар: гексокиназа, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа қўшилади. Аралашма танланган ҳароратда (25˚С ёки 37˚С)преинкубирланади, кейин қон зардобига киритилади, «лаг-давр»дан кейин ( 5 дан 20 мингача ) эритманинг оптик зичлиги ошганлиги 340 нм да қайд қилинади.НАДФНнинг ютилиш микромоляр коэффициенти оқибат фаоллиги ҳисобланади .
Креатин(фосфо)киназа активлигини аниқлашнинг клинико-диагностик аҳамияти
КФК Изоферментлари скелет мускулларда, миокард ва бош мияда жойлашган. ИМда энзим активлиги (асосан изоформ - МВ) хуруж бошлангандан 2-3 соатдан кейин ошади, 2 – 3-суткада эса жараён нормаллашиши кузатилади.
Асоратланмаган стенокардияда КФК даражаси ўзгармайди.
Бу энзим мушак касалликларида – миокардит, скелет мускулларининг яллиғланишли ва дистрофик шикастланишларида, пароксизмал тахикардия, юрак катетеризациясида баланд бўлади.
КФК фаоллиги ревмокардит, алкоголли интоксикация, юрак етишмовчилигида димланишда ,ўпка артерияси эмболиясида, шунингдек марказий нерв системаси касалликлари ва оператив муолажаларида кескин ошади.