Baliqlar sinfini o'rganishning zamonaviy usullari reja: Baliqlar ekologiyasi

DNK sekvensiyasi usullari

DNK ketma-ketligini aniqlashning birinchi usuli 1970- yildaKornel universitetidaRey Vutomonidan oʻrnatilgan joylashuvga xos primer kengaytma strategiyasini oʻz ichiga olgan. DNK polimeraza katalizi va oʻziga xos nukleotid yorligʻi, har ikkisi ham joriy ketma-ketlik sxemalarida muhim oʻrin tutadi, ketmaketlik uchun foydalanilgan. lambda fag DNKsining birikuvchi uchlari. 1970-1973 yillar orasida Vu, R Padmanabhan va uning hamkasblari bu usuldan har qanday DNK ketma-ketligini sintetik joylashuvga xos primerlar yordamida aniqlashda foydalanish mumkinligini ko'rsatdi.Frederik Sangerkeyin yana tez DNK ketmaketliklar usullarini ishlab chiqish, bu primer-kengaytirish strategiyasini qabulMusnad markazi,Kembrij, Buyuk Britaniya va 1977 yilda "zanjir-bekor ingibitorlari bilan DNK tartibida" uchun bir usul bilan chopValter GilbertvaAllan MaksamdaGarvardham sekvensiyalash usullarini ishlab chiqdi, jumladan, "kimyoviy parchalanish orqali DNKni ketma-ketlashtirish" uchun. 1973-yilda Gilbert va Maxam 24 ta tayanch juftlik ketma-ketligi haqida maʼlum qildilar. Sekvensiyadagi yutuqlargarekombinant DNKningbir vaqtda rivojlanishi yordam berdi. DNK namunalarini viruslardan boshqa manbalardan ajratib olish imkonini beruvchi texnologiya.

Genom sekvensiya

Birinchi toʻliq DNK genomi 1977-yildaphX174 bakteriofagigategishliboʻlgan.Tibbiy tadqiqot kengashiolimlari 1984 - yildaEpshteyn-Barr virusiningtoʻliq DNK ketma-ketligini hal qilib , unda 172 282 nukleotid borligini aniqlashgan. Ketma-ketlikning tugallanishi DNK ketma-ketligida muhim burilish nuqtasi bo'ldi, chunki bu virusning genetik profili haqida oldindan ma'lumotga ega bo'lmagan holda erishildi. 1980-yillarning boshlarida Gerbert Pohl va uning hamkasblari tomonidanelektroforezpaytida ketma-ketlik reaktsiyasi aralashmalarining DNK molekulalarini immobilizatsiya qiluvchi matritsaga o'tkazishning radioaktiv bo'lmagan usuli ishlab chiqilgan.GATC Biotechkompaniyasitomonidan "To'g'ridan-to'g'ri Blotting-Elektroforez-System GATC 1500" DNK sekvenserining tijoratlashuvi ortidan , bu DNKning to'liq ketma-ketligi Evropa Ittifoqining genomlarni ketma-ketlashtirish dasturi doirasida ishlatilgan. xamirturushSaccharomyces cerevisiaeII xromosomasi.Kaliforniya Texnologiya InstitutidagiLeroy E. Hudninglaboratoriyasi 1986 yilda birinchi yarim avtomatlashtirilgan DNK sekvensiyasi mashinasini e'lon qildi. 1987 yildaApplied Biosystemstomonidan birinchi to'liq avtomatlashtirilgan sekvensiya mashinasi ABI 370 va Dupontning Genesis 2000 marketingi amalga oshirildi, bu esa barcha to'rt dideoksinukleotidni bir qatorda aniqlash imkonini beruvchi yangi lyuminestsent yorliqlash texnikasidan foydalangan. Dumaloq xromosoma 1,830,137 ta bazani o'z ichiga oladi va uning Science jurnalida chop etilgan butun genom ov miltig'i ketmaketligining birinchi nashr etilgan qo'llanilishini belgilab berdi, bu esa xaritalash uchun dastlabki harakatlarga ehtiyojni yo'q qildi. 2001 yilga kelib, ov miltig'i ketmaketligi usullari inson genomining qoralama ketma-ketligini yaratish uchun ishlatilgan.