M. G. Safin, B. S. Alikulov, F. A. Ruziev

 

3-AMALIY ISH: 

Mavzu:  Glyukozafosfatizomeraza fermentini ajratish, tozalash va faolligini 

aniqlash 

Glyukozafosfatizomeraza 

fermenti 

glyukoza-6-fosfatni 

fruktoza-6-fosfatga 

aylanish  reaksiyasini  katalizlaydi: 

 

 

 

glyukoza-6-fosfat                                           fruktoza-6-fosfat 

 

---

 

- 36 - 

 

Bu  reaksiya  qaytar  reaksiyadir.  Ushbu  ferment  xilma-xil  biologik 

manbalardan  ajratib  olingan.  Glyukozafosfatizomeraza  fermenti  ikkita  subbirlikdan 

iborat  bo`ladi.  Fermentativ  reaksiya    ATF  va  glyukonat-6-fosfat  tomonidan 

ingibirlanadi.  Molekulyar  og`irligi  14000-15000  Da,  pH  –  8,5,  harorat  30 

0

C 

bo`lganda  glyukoza-6-fosfat  uchun  Mixaelis  konstantasi    -  3,1x10

-4

  M,  fruktoza-6-

fosfat uchun esa 1,7x10

-4

  M ni tashkil  qiladi. 

 

Kerakli  reaktivlar:   

1.  0,015 M EDTA li  eritmada  tayyorlangan  0,01 M HCl eritmasi,  pH – 7,0; 

2.  1,0 M Zn(CH

3

COO)

2

 eritmasi; 

3.  1 n NaOH eritmasi; 

4.  0,25 M natriy-sitrat  eritmasi,  pH – 8,5; 

5.  (NH

4

)

2

SO

4

 quruq kukun (EDTA li  eritmada  qayta kristallangan); 

6.  0,1 M  Mg(CH

3

COO)

2

*4H

2

O  eritmasi; 

7.  0,5 n NH

4

OH eritmasi; 

8.  0,025 M EDTA eritmasi,  pH – 8,0; 

9.  Etil  spirti; 

10.  Atseton; 

11.  0,2 M CH

3

COOH eritmasi; 

12.  Bentonit; 

13.  0,2 M tris-HCl  bufer eritmasi,  pH – 8,0; 

14.  0,1 M  Na

2

HPO

4

 eritmasi; 

15.  (NH

4

)

2

SO

4

 ning  to`yingan  eritmasi. 

Barcha  eritmalar  komyoviy  toza  rusumli  reaktivlardan  tayyorlangan  bo`lishi  va 

bidistillangan  suvda tayyorlanishi  lozim.