22-ish. Oqsillarning izoelektrik nuqtasini aniqlash
Kerakli biomaterial: jelatina va kazein oqsillari eritmalari.
Kerakli jihozlar: shtativ, probirkalar, shisha tayoqchalar, pipetkalar.
Kerakli reaktivlar:natriy gidrofosfatning 0,2 M eritmasi, spirt yoki
taninning 0,1% li eritmasi, sirka kislotaning 0,1 N eritmasi, distillangan
suv, natriy atsetatning 0,2 M eritmasi, limon kislotaning 0,1 M eritmasi,
sirka kislotaning 0,2 M eritmasi.
1- tajriba. Jelatinaning izoelektrik nuqtasini aniqlash.
Ishni bajarish tartibi. 6 ta probirkaga jadvalda (3-jadval)
ko‘rsatilgan miqdorda 0,2 M natriy atsetat CH
3
COOH va 0,2 Msirka
kislota eritmalaridan quyiladi. Hamma probirkalarda 1 ml dan bufer
aralashma tayyor bo‘ladi, uning ustiga 0,5 ml dan 1 % li jelatina
qo‘shiladi. So‘ngra yaxshilab aralashtirilgach 2 ml dan etil spirti yoki 1 ml
dan 0,1% li tanin eritmasi qo‘shiladi. 5 daqiqadan keyin qaysi probirkada
ko‘proq loyqalanish paydo bo‘lgani belgilanadi. Agar loyqa bo‘lmasa
minus (-), aralashma loyqalansa, loyqaning quyuqligiga qarab 1,2 yoki 3 ta
plus (+) ishorasi bilan belgilanadi. Qaysi probirkadagi loyqalanish eng
yuqori bo‘lsa, jadvalga qarab shu probirkadagi suyuqlikning pH darajasi,
shuko‘rsatmalarga
qarab esa, tekshirilayotgan oqsilning izoelektrik nuqtasi
aniqlanadi.
3-jadval
Jelatinaning izoelektrik nuqtasini aniqlash
№
0,2 M
natriy
asetatning
miqdori /ml
0,2 M sirka
kislotaning
miqdori /ml
Aralashman
ing pH
ko‘rsatkichi
Qo‘shilgan
jelatinanin
g miqdori
/ml
Qo‘shilgan
taninning
miqdori /ml
Loyqalan
ish
darajasi
1
0,1
0,9
3,80
0,5
1
--
2
0,2
0,8
4,15
0,5
1
+ --
45
3
0,4
0,6
4,60
0,5
1
++--
4
0,5
0,5
4,70
0,5
1
+++
5
0,8
0,2
5,35
0,5
1
+ --
6
0,9
0,1
5,70
0,5
1
--
Do'stlaringiz bilan baham: |