Методические указания по выполнению лабораторных работ Направление подготовки

Принцип метода. Прямой метод заключается в непосредственном подсчёте количества 
микробных клеток в мазках из молока. Косвенный метод основан на способности 
микроорганизмов разрушать метиленовый голубой. 
Ход анализа. 
Разделиться на группы по количеству проб молока. Выбрать пробу молока 
для исследования (одну пробирку на 25 мл и одну пробирку на 50 мл с одинаковыми 
номерами). 
Исследовать выбранную пробу молока (в пробирке на 25 мл) по методу Брида 
(прямой метод), отнести молоко к определённому классу. 
Для этого на предметном стекле восковым карандашом нанести квадрат площадью 
2 × 2 см. Дозатором в центр квадрата внести 0,01 мл испытуемого молока и равномерно 
распределить его в пределах квадрата при помощи покровного стекла. Мазок 
подсушить над пламенем горелки, зафиксировать и обезжирить 10 мин в 96%-м 
растворе этилового спирта. Окрасить мазок в течение 3 мин спиртоводным раствором 
метиленового голубого, промыть водой, высушить фильтровальной бумагой и 
микроскопировать под масляной иммерсионной системой. 
Подсчитать количество микробов в трёх полях зрения микроскопа и определить 
среднее их число в одном поле. Умножить полученное число на 20000 полей зрения, 
содержащихся в квадрате: 400 мм
2
(площадь квадрата) / 0,02 мм
2
(площадь одного поля 
зрения) = 20000. Это количество микробов в 0,01 мл молока. Чтобы узнать число 
микробов в 1 мл молока полученное значение необходимо умножить на 100. 

---

10 
Выполнить оценку полученного результата (табл. 1) и сообщить результат другим 
группам для фиксации его в тетрадях. 
Исследовать выбранную пробу молока (в пробирке на 50 мл) по методу 
редуктазной пробы (косвенный метод) и отнести молоко к определённому классу. 
К 20 мл исследуемого молока в пробирку добавить 1 мл рабочего водного раствора 
метиленового голубого, тщательно перемешать покачиванием, подогреть в пламени 
горелки до температуры 35–40 ºС и поставить в термостат на 5,5 часов при 37 ºС. 
Учёт процесса обесцвечивания молока провести через 20 мин, 2 часа и 5,5 часов. 
Окраску верхнего и нижнего слоёв молока шириной до 1 см не учитывать. 
Выполнить оценку полученного результата (табл. 1) и сообщить результат другим 
группам для фиксации его в тетрадях. 
Таблица 1 
Микробиологическая оценка качества молока методом Брида 
и редуктазной пробой 
Класс 
молока 
Качество молока 
Количество 
бактерий в 1 мл 
молока 
Скорость 
обесцвечивания 
метиленового 
голубого 
1 
хорошее 
до 500 тыс 
не менее 5,5 ч 
2 
удовлетворительное 
до 4 млн 
от 2 до 5,5 ч 
3 
плохое 
до 20 млн 
от 20 мин до 2 ч 
4 
очень плохое 
более 20 млн 
менее 20 мин