23
Работа 8. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КСАНТУРЕНОВОЙ
КИСЛОТЫ В МОЧЕ
Цель работы: освоить метод количественного
определения ксантуре-
новой кислоты в моче. Научиться использовать тест для диагностики вро-
жденных нарушений обмена аминокислот.
Ксантуреновая кислота – продукт обмена триптофана, появляющийся в
моче в значительных количествах при нарушении обмена этой аминокис-
лоты.
Принцип метода основан на определении интенсивности зеленого ок-
рашивания, возникающего при взаимодействии ксантуреновой кислоты с
железоаммониевыми квасцами.
Порядок выполнения работы:
В две пробирки с метками на 10 мл внести по 1 мл насыщенного рас-
твора NаНСО
3
, добавить по 5 капель 0,425% раствора железоаммониевых
квасцов и встряхнуть до исчезновения образующейся мути.
Затем в одну
(опытную) добавить 20 капель исследуемой подщелоченной мочи и пере-
мешать. К полученной смеси добавить 5 мл дистиллированной воды и 1
каплю фенолфталеина, раствор окрашивается в розовый цвет.
Добавить
1,0н р-р НС1 (по каплям) до исчезновения розовой окраски. Получившую-
ся смесь довести дистиллированной водой до 10 мл, энергично встряхнуть
и через 4-5 минут измерить экстинкцию на ФЭКе при красном свето-
фильтре.
Контроль готовят также, но вместо мочи
добавляют дистиллирован-
ную воду. При расчѐте пользуются калибровочной кривой, построенной по
стандартному раствору ксантуреновой кислоты.
Для расчета использовать стандартную кривую и формулу:
X – количество мг ксантуреновой кислоты, выделенной с
мочей за сутки,
А – количество мкг ксантуреновой кислоты, найденное по ка-
либровочной кривой,
В – общий объем суточной мочи (1200-1500 мл),
10 –
разведение мочи,
1000 – коэффициент для пересчета в мг.
Содержание ксантуреновой кислоты в моче
в норме 0-30 мг.
Данные
оформить в виде протокола, сделать вывод.
