Учебно-методическое пособие по биологической химии часть 2 Обмен белков, обмен липидов, биохимия крови, печени, мочи, слюны

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Б. Унифицированный метод 
1. Определение активности аспартатаминотрансферазы (АсАТ) 
Принцип метода: основан на определении скорости образования НАД 
за счет окисления НАДН+Н. В результате реакции уменьшается оптическая 
плотность раствора. 
Химизм: α-кетоглугарат + аспартат ↔ глугамат + оксалоацетат. 
оксалоацетат + НАДН+Н ↔малат + НАД 
Уменьшение концентрации НАДН+Н пропорционально активности 
АсАТ. 
Порядок выполнения работы: 
В чистую пробирку внести 20 капель рабочего раствора для определе-
ния АсАТ, добавить 2 капли (точно) сыворотки, крови и инкубировать 3 
минуты при 37° С. Определить экстинкцию на ФЭК-М при толщине кюве-
ты 3 мм против дистиллированной воды при зеленом светофильтре. 
 
 

---

15 
Расчет: активность АсАТ = E/3xF мккат/л, 
где 
Е – показание прибора, 
F – коэффициент пересчета, равный 29,
3 – пересчет на 1 минуту. 
В норме активность АсАТ – 0,1-0,7 мккат/л. Активность можно расчи-
тывать в условных единицах, в этом случае коэффициент равен 1750. Нор-
ма – 5-40ед/л. 
2. Определение активности алаиинаминотрансферазы (АлАТ) 
Принцип метода: основан на определении скорости образования НАД 
за счет окисления НАДН+Н. В результате реакции уменьшается оптическая 
плотность раствора. 
Химизм: α-кетоглутарат + аланин ↔ пируват + глутамат
пируват + НАДН+Н ↔ лактат + НАД 
Уменьшение концентрации НАДН+Н пропорционально активности 
АлАТ. 
Порядок выполнения работы: 
В чистую пробирку внести 20 капель рабочего раствора для определе-
ния АлАТ, добавить 2 капли (точно) сыворотки крови и инкубировать 3 
минуты при 37° С. Определить экстинкцию на ФЭК-М при толщине кюве-
ты 3 мм против дистиллированной воды при зеленом светофильтре. 
Расчет: активность АлАТ = E/3xF мккат/л, 
где 
Е – показание приборы, 
F – коэффициент пересчета, равный 29,
3 – пересчет на 1 минуту.
В норме активность АлАТ = 0,1-0,7 мккат/л. Активность можно рас-
читывать в условных единицах, в этом случае коэффициент равен 1750. 
Норма- 5-30 ед/л. Данные оформить в виде протокола, сделать вывод. 

---

16