Принцип метода: Метод основан на способности энольной формы фенилпировиноградной кислоты образовывать с ионами трехвалентного железа комплексное соединение, окрашеное в сине-зеленый цвет.
Ход работы: к 5мл мочи приливают 4 капли 5Н раствора серной кислоты, перемешивают и добавляют к смеси 4 капли 10% раствора FеСI3. При наличии в моче фенилпировиноградной кислоты через 30сек- 1мин. появляется сине-зеленое окрашивание.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ АЦЕТОНОВЫХ ТЕЛ
Проба с хлорным железом: 1мл мочи + 5капель хлорного железа =вишнево-красное окрашивание.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ САХАРА- РЕАКЦИЯ НИЛАНДЕРА.
Реакция Ниландера относится к окислительно-восстановительным методам определения сахара. Она основана на окислении глюкозы солью висмута Вi(NО3)2 в щелочной среде.
R- COH + Bi ------------- R-COOH +Bi
ОН
При кипячении, в случае наличия сахара в моче, выпадает черный осадок металлического висмута.
Ход работы: к 1-2мл патолог. мочи прибавляют 0,5мл реактива Ниландера и кипятят 2 мин.
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №1
ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЛКА СЛЮНЫ БИУРЕТОВЫМ МЕТОДОМ.
Принцип метода: белки в щелочной среде реагируют с сернокислой медью с образованием комплексных соединений, окрашенных в фиолетовый цвет. Интенсивность окрашивания пропорциональна концентрации белка в растворе.
Ход определения:
1.Тщательно прополоскать рот водой;
2.Отмерить в стаканчик 20 мл дистиллированной воды, прополоскать рот и выплюнуть содержимое в тот же стаканчик;
3.Впробирку отмерить 3,0 мл разведенной слюны (из стаканчика), добавить 3,0 мл биуретового реактива и через 30 минут колориметрировать на ФЭКе против контроля (зеленый светофильтр).
Приготовление контроля: 3,0 мл физ. раствора + 3мл биуретового реактива.
Время экспозиции 30 мин.
Количество белка определяется по калибровочному графику.
Do'stlaringiz bilan baham: |