Аффин хромотографияси


Нуклеотид ва нуклеин кислоталарни ажратиш


Download 1.55 Mb.
bet10/42
Sana31.01.2024
Hajmi1.55 Mb.
#1829064
1   ...   6   7   8   9   10   11   12   13   ...   42
Bog'liq
Аффин хроматография қўлланма 2023

Нуклеотид ва нуклеин кислоталарни ажратиш.

Манонуклаинлар олигануклатитлар ва нуклагин кислоталар интер матрицалар Билан ковалент богланган булиб улар уз навбатида ажратиш учун уларнинг интези ва поргаланишда иштирок етувчи нуклаин кислоталар ва ферментлар физик-кимёвие хусусиятларни тадкик этишга яроклидир.


Нуклеин кислаталарни иммобилланган асосидир. Нуклиозид ва олигамодларни нуклин кислоталарнинг структурасини аниклашда хамда ажратишда куллаш мумкин. Мисол сифатида Биламва Робинзонлар томонидан келтирган нуклаин кислоталарни кетма-кетлигин урганишни келтириш мукин. Масалан улар тимидин полинуклеотид-целулозаза тулдирилган колонкада гкптануклеотидларни ажратишган. ДНК-целюлозадаги хроматография Албер ва Геррик (1) маколалрда куриб чикилган .
Хайвон ва вирусларнинг купгина инфармацион РНК лари полиаденил кислотага бойдур. Купинча бу холат уларни хроматография усули Билан ургатилади кислата тутган ажратиб олишга гимон булади. 94-96% якин ДНК Лар биринчи нуктада илюгирланиб РНК ни тутади. Иккинчи нуктада ажраган илюот рибасома РНК дан ташкари Яна инфараацион ДНК 105 глобинни тутади. Де Ларко ва Груов (11) катор целилозаларни синовдан утказиб унда целилоза хосилаларини гомонуклиатитлар олигамирларни боглаш хоссаларини бисулъфит натри Билан ишлов бериши сорбцяланадиган полиадни кислоталани кислоталани камайишига олиб келади бундан шундай хулоса кииш мумкинки богланиш лигинга ухшимда аралашмаларининг борлиги Билан гиардлангандир.
Линбер ва Персан Веткам хаммуолимлари Билан бирга хайвон хужайралари полисамаритдан РНК ни ажратиш учун полиурудил кислота биланковолент богланган сефарозани кулланган эдиламон хам сефарозадан тайёрлаган аффен сарбентни куллаган бирок бу сарбент ДНК кага нисбатан аффин булмайди, балки ДНК дан кийинлиги Билан тозаланидиган пластиклар аралашмаларига тугри келадиган ликтинлар нисбатан модификацияланади. Энг куп кулланиладиганбу канканавин А –сефароздир, чунки эчисбадан умумий полисахарид аралашмаларига гликоген ёки крахмал ухшаш моддалар хисобланади. Агарда мухитта гуликоза фруктоза ёки манозодон ташкари бошка гурух тутган полисахаридлар булса у холда бошка имобилланадиган пектинларни куллаш керак булади. Гиотт ва бошкалар (50) жуфт асослар хосил булиши механизм буйича эркин нуклатитларни талаб ажратиш учун имобилланган олигануклаититларни куллайди . Кмпанинтлар олигануклатитларни кузгалувчан фазода имобилланагн матрицада танлаб сорбентланади. Десорбент эса харорат граденти ёрдамида амалга оширилади.
Матрициали хроматографик олигануклоитидларни пепитлар Билан узаро ткъсирини ва нуклоититд асосларини булиши олигонуклеатитларни спесификлигини урганишга имкон беради.


    1. Download 1.55 Mb.

      Do'stlaringiz bilan baham:
1   ...   6   7   8   9   10   11   12   13   ...   42




Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling