Biokimyo pmd
Download 4.12 Mb. Pdf ko'rish
|
Sobirova R.A biokimyo
- Bu sahifa navigatsiya:
- Elektroforez usuli
- Oqsil strukturasini o‘rganish usullari
|
e) Afin xromatografiya.
Bu xromatografiya usulli quyidagi prinsiplarga asoslangan bo‘ladi: ajratib olinishi lozim bo‘lgan oqsilga spetsifik bo‘lgan modda Z- ligandda erimaydigan M moddasiga mustahkam qilib biriktiriladi. Shunday qilib, tayyorlangan MZ-adsorbenti xromatografiya kolonkasiga solinadi va u orqali oqsil aralashmasi o‘tkaziladi. Bunda P oqsili spetsifik adsorbent bilan birikadi. MZ+P=MZP. So‘ngra kolonka yaxshilab yuviladi va birikkan P-oqsilining birikmasini dissotsiatsiya qiluvchi eritma bilan ajratib kolonkadan chiqariladi. Elektroforez usuli Bu usul bo‘yicha oqsillar elektr maydonida har xil harakatlanish tezligiga asoslanib fraksiyalarga bo‘linadi. Filtr qog‘ozida o‘tkaziladigan elektroforez usuli yordamida inson qon zardobidagi oqsillarni 6 34 fraksiyaga ajratish mumkin. Qog‘ozda o‘tkaziladigan elektroforezdan tashqari hozirgi vaqtda kraxmal geli, poliakrilamid va sellyulozada oqsillarni elektroforez yordamida fraksiyalarga bo‘lish va ajratish mumkin. Filtr qog‘ozi o‘rniga yuqorida ko‘rsatilgan moddalar elektroforezda ishlatilganda qon zardobi oqsillarini ko‘proq fraksiyalarga ajratish mumkin. Masalan: kraxmal gelida 10 ta, poliakrilamid gelida 18 ta oqsil fraksiyalarini olish mumkin. Elektroforez yordamida ajratilgan oqsilni aniqlash uchun qog‘oz va gellar bromfenol yoki 10 V amid qora bo‘yog‘i bilan va boshqa oqsil bilan rang beruvchi reaktivlar bilan ishlanadi. Oqsil strukturasini o‘rganish usullari Oqsillarni gomogen holda ajratib olish ularning birlamchi, ikkilamchi, uchlamchi va to‘rtlamchi strukturasini o‘rganishga imkoniyat tug‘diradi. Oqsilning aminokislota tarkibini aniqlash uchun oqsil to‘la aminokislotalargacha gidroliz qilinadi va analizatorlar yordamida aminokislotalar tekshiriladi. Oqsilning ikkilamchi strukturasini esa izotop almashinish usuli, ultrabinafsha va infraqizil spektrosko‘p usullari yordamida aniqlanadi. Bu usullar polipeptid zanjirni spirallanish darajasini aniqlashga imkoniyat beradi. Oqsilning uchlamchi va to‘rtlamchi strukturasi – elektron mikrosko‘p va rengenostruktur tahlil yordamida aniqlanadi. Download 4.12 Mb. Do'stlaringiz bilan baham: 
|