M. G. Safin,D. G‘. Hayitov, yu. S. Ruziyev
Download 2.82 Mb. Pdf ko'rish
|
- Bu sahifa navigatsiya:
- Ishni bajarish tartibi.
- 7-mavzu.Oqsillarni gidrolizlash
- 6-jadval Ba’zioqsillarningaminokislotatarkiblarihaqidama’lumot(% hisobida). Aminokislota Pepsin Tuxum albumi
- IV. Asosli (musbat zaryadlangan) aminokislotalar L- lizin L-gistidin L- arginin
5-jаdval Oqsilning % miqdorini nur sindirish ko‘rsatkichiga binoan hisoblash Si ni sh k o‘r sa tki ch i Qon zardobi Si ni sh k o‘r sa tki ch i Qon zardobi Shka la d a g i ko ‘r sa tki ch Shka la d a g i ko ‘r sa tki ch Shka la d a g i ko ‘r sa tki ch Оқ сил % Interp o ly a ts io n ja d v a ll a r 1,33705 25 0,63 1,34575 48 5,68 0,8 0,17 53 1,33743 26 0,86 Int. jad. 20 1,34612 49 5,90 0,9 0,19 1,33781 27 1,08 1,34650 50 6,12 1,33820 28 1,30 0,1 0,02 1,34687 51 6,34 1,33858 29 1,52 0,2 0,04 1,34724 52 6,55 Int. jad. 22 1,33896 30 1,74 0,3 0,06 1,34761 53 6,77 1,33934 31 1,96 0,4 0,08 1,34798 54 6,98 1,33972 32 2,18 0,5 0,10 1,34876 55 7,20 1,34000 33 2,40 0,6 0,12 1,34870 56 7,42 0,1 0,02 1,34048 34 2,62 0,7 0,14 1,34910 57 7,63 0,2 0,04 1,34086 35 2,84 0,8 0,16 1,34947 58 7,85 0,3 0,06 1,34124 36 3,06 0,9 0,18 1,34984 59 8,06 0,4 0,08 1,34162 37 3,28 1,35021 60 8,28 0,5 0,10 1,34199 38 3,50 Int. jad. 21 1,35058 61 8,49 0,6 0,12 1,34237 39 3,72 1,35095 62 8,71 0,7 0,15 1,34275 40 3,94 1,35132 63 8,92 0,8 0,17 1,34313 41 4,16 0,1 0,02 1,35169 64 9,14 0,9 0,120 1,34350 42 4,38 0,2 0,04 1,35205 65 9,35 1,34388 43 4,60 0,3 0,06 1,35242 66 9,57 1,34426 44 4,81 0,4 0,08 1,35279 67 9,78 1,34463 45 5,03 0,5 0,11 1,35316 68 9,99 1,34500 46 5,25 0,6 0,13 1,35352 69 10,20 1,34537 47 5,47 0,7 0,15 1,35388 70 10,41 26- ish. Oqsil miqdorini spektrofotometrik uslubda aniqlash. 54 Kerakli biomaterial:oqsilli eritma, qon zardobi. Kerakli jihozlar: spektrofotomert SF-4A shtativ, probirkalar, pipetkalar. Kerakli reaktivlar:0,9 % li natriy xlor eritmasi, distillangan suv. Oqsillar miqdorini spektrofotometrik uslubda aniqlash ularning tarkibida bo‘lgan aromatik aminokislotalar (triptofan, tirozin qisman fenilalaninlar)ning 280 nm to‘lqin uzunligida ultrabinafsha nurni maksimal yutish qobiliyatiga ega bo‘lishiga asoslangan. Shu to‘lqin uzunligida o‘lchov o‘tkazish orqali eritmadagi oqsil miqdori aniqlanadi. Oqsillarni bir xil miqdorda olinganda ularning tarkibidagi aromatik aminokislotalarning miqdoriy ko‘rsatkichlari har xil bo‘lganligi sababli nurni yutish ko‘rsatkichlari ham bir xil bo‘lmaydi. Lekin bunda konsentrasiyasi shartli ravishda «o‘rtacha qiymatga», ya’ni 1 mg/ml ga keltirilgan oqsil eritmasini 280 nm da(suyuqlik qatlamini qalinligi 1 sm bo‘lganda) optik zichligini 1,0 deb qabulqilinadi. Oqsil eritmasi tarkibida nuklein kislotalar yoki nukleotidlarning bo‘lishi bu uslub yordamida oqsil miqdorini aniqlashga halaqit beradi. Bir xil oqsil eritmasining optik zichligini 260 nm va 280 nm da o‘lchash orqali nomogramma (7-rasm) dan foydalanib miqdoriy tahlil o‘tkazish mumkin. Ishni bajarish tartibi. Buning uchun eksperimental yo‘l bilan 260 nm va 280 nm to‘lqin uzunliklarida aniqlangan optik zichliklar nomogrammaning tegishli ustunchalaridan topiladi va ularni to‘g‘ri chiziq bilan birlashtiriladi bu chiziqning shkala bilan kesishgan joyiga qarab tatqiq qilinayotgan eritmadagi oqsilning konsentratsiyasi aniqlanadi. Shuningdek shu ma’lumotlardan foydalanib 280 nm va 260 nm da optik zichliklarni aniqlash ko‘rsatkichlari asosida Kalkar formulasi yordamida oqsil miqdorini aniqlash mumkin. Bu ishni amalga oshirish oqsil miqdorini =1,45•D 280 - 0,74•D 260 mg/ml hisobida hisoblash imkonini beradi. 7-mavzu.Oqsillarni gidrolizlash 55 Tabiatda 300 ga yaqin aminokislotalarning uchrashi isbotlangan, ulardan 20 tasi barcha tirikorganizmlarning oqsillari tarkibiga kiradi, shuning uchun ularni proteinogen aminokislotalar deyiladi. Qolgan tabiiy aminokislotalar oqsillar, karbonsuvlarvalipidlarningalmashinuvinioraliqmahsulotlarisifatidahosilbo‘ lishimumkin. Yuzlab oqsillarning aminokislota tarkibi batafsil o‘rganilgan va har bir oqsil aminokislota tarkibining ham sifat, ham miqdor jihatdan farq qilinishi aniqlangan, quyidamisoltariqasidaulardanba’zilarikeltirilgan (6-jadval) 6-jadval Ba’zioqsillarningaminokislotatarkiblarihaqidama’lumot(% hisobida). Aminokislota Pepsin Tuxum albumi ni Ot mioglobi ni Ot gemoglo bini Xo‘kiz musha gi Kaz ein Alanin 4,51 6,72 7,95 7,40 4,0 2,8 Glisin 8,10 3,05 5,85 5,60 5,0 0,6 Valin 7,09 7,05 4,09 9,10 5,8 6,7 Leysin 10,43 9,20 16,80 15,40 7.7 9.9 Izoleysin 10,03 7,0 - - 6.3 6.5 Prolin 4,90 3,60 3,84 3,90 6.0 8.0 Fenilalanin 6,73 7,66 6,09 7,70 4.9 5.2 Tirozin 9,40 3,68 2,40 3,03 3.4 6.9 Triptofan 3,50 1,20 2,34 1,70 1.3 1.4 Serin 13,20 8,15 3,46 5,80 5.4 7.5 Treonin 9,50 4,03 4,56 4,36 4.6 4.1 Sistein 1,45 1,35 - 0,56 2.6 0.6 Metionin 2,07 5,20 1,71 1,00 3.3 3.5 Arginin 0,97 5,72 2,20 3,65 7.7 4.2 Gistidin 0,47 2,35 8,50 8,71 2.9 2.5 Lizin 0,43 6,30 15,50 8,51 8.1 7.9 Aspartat 16,63 9,30 8,20 10,60 6.0 6.3 Glutamat 11,34 16,50 16,68 8,50 15.4 24.2 6-jadval ma’lumotlaridan ko‘rinib turibdiki, har xil oqsillarning aminokislota tarkiblari bir biridan ancha farq qiladi. Aminokislotalarni ulardagi radikallarni kimyoviy tuzilishiga asoslangan holda tasniflanadi. Eng avvalo aromatik va alifatik hamda 56 oltingugurt yoki gidroksil guruhlarini tutuvchi aminokislotalar farqlanadi. Agar radikal neytral (bir amino- va bir karboksil guruhli) bo‘lsa, ularni neytral aminokislotalar deyiladi. Agar aminokislotaning amino- yoki karboksilguruhi ziyod bo‘lsa, unda ularni o‘zaro mos holda asosli yoki nordon aminokislotalar deyiladi. Aminokislotalarni zamonaviy tasniflanishi radikallarning qutbligiga asoslangan, ya’ni ularning suv bilan ta’sirlanish xususiyatiga bog‘liqholda amalga oshiriladi. Shu nuqtai nazardan aminokislotalarni 4 ta sinfga bo‘linadi: -qutbsiz (gidrofob); -qutbli (gidrofil); -nordon (manfiy zaryadlangan); -asosli (musbat zaryadlangan). I. Qutbsiz (gidrofob) aminokislotalar: L- alanin L- Metionin L- valin L- prolin L- leysin L- Fenilalani n L- izoleysin L- Triptofan II. Qutbli (gidrofil) aminokislotalar: L- Glisin L- Tirozin L- Serin L- Asparagin 57 L- Treonin L- Glutamin L- Sistein III. Nordon (manfiy zaryadlangan) aminokislotalar: L- Asparagin kislota L- Glutamin kislota IV. Asosli (musbat zaryadlangan) aminokislotalar L- lizin L-gistidin L- arginin Oqsillarning aminokislota tarkibini miqdoriy va sifatiy jihatdan o‘rganish uchun bu makromolekulyar moddalarni gidrolizlash talab qilinadi. Qo‘llaniladigan katalizatorlarga qarab gidroliz kislotali, ishqoriy va fermentativ bo‘lishi mumkin. Odatda laboratoriya sharoitida kislotali gidrolizdan ko‘proq foydalaniladi. Ishqoriy gidrolizdan triptofanning miqdorini aniqlashda foydalaniladi. Chunki triptofan ishqoriy gidrolizda deyarli o‘zgarishga duch kelmaydi, qolgan aminokislotalarning ancha qismi parchalanib ketadi. Kislotali gidrolizda triptofan to‘liq, serin, treonin, sistein, tirozin va fenilalaninlar qisman parchalanadi. Darsning maqsadi.Biologik materiallar tarkibidagi oqsillarni gidrolizini laboratoriya sharoitida amalga oshirib, oqsillarni bosqichma bosqich parchalanishini, gidroliz natijasida karboksil va aminoguruhlarning oshaborishini, gidrolizning nihoyasida aminoguruhlar sonini doimiy bo‘lib qolishini e’tiborga olib, ularni bilvosita yo‘l bilan sarhisob qilish orqali nazariy bilim, ko‘nikma va malakalarni shakllantirish. 27- ish. Oqsillarni kislotali gidrolizi 58 Bu ishni bajarishda uch xil tajriba o‘tkazish lozim bo‘ladi, ya’ni: gidrolizni amalga oshirish, oqsillarni gidrolizlanish darajasini Syorensonning formol titrlash uslubida aniqlash va gidroliz natijalariga muvofiq oqsillarni parchalanish darajasini baholash amalga oshiriladi. Kerakli biomaterial: tuxum oqsili, bug‘doy, sut globulini, sut kazeini. Download 2.82 Mb. Do'stlaringiz bilan baham: |
Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling
ma'muriyatiga murojaat qiling