MİNİstrliGİ qaraqalpaq ma’mleketlik universiteti
Download 5.81 Kb. Pdf ko'rish
|
- Bu sahifa navigatsiya:
- 1. Rekombinant DNK alıw usılları
- 3. Genler bibliotekasını jaratıw h’a’m individual genlerdi ajıratıw texnologiyası
- L E K 5s İ Ya № a’u’ Kletka injenerligi, a’h’miyeti h’a’m uazıypaları Jobası`
- 1. Kletka injenerliginin’ a’h’miyeti h’a’m wazıypaları
- 2. Organ, toqıma h’a’m protoplasttın’ jasalma azıqlıq ortalıqta o’siriw h’a’m sterillew usılları. Azıqlıq ortalıqta tan’lawdın’ tiykarg’ı printsipleri
- 4. Kletka suspenziyası h’a’m ayırıqsha kletkalar kulturası.
- 5. 8n v854o usılı ja’rdeminde jasawg’a beyimlespegen duragaylardı ko’beytiriw
- Postgam shag’ılıspawshılıqtı (chatishmaslikni) jen’iw.
- 8n v854o gaploidlar alıw, olardı selektsiyada qollaw
- 7. Ajıratılg’an protoplastlardın’ bir-birine qosıw usılları
L E K 5s İ Ya № a’o’ Rekombinant DNK alıw, genler bibliotekasın jaratıw texnologiyası 53 Jobası` 1. Rekombinant DNK alıw usılları. 2. Vektor molekulaları. 3. Genler bibliotekasını jaratıw h’a’m individual genlerdi ajıratıw texnologiyası. 1. Rekombinant DNK alıw usılları. Gen injenerliginin’ fundamenti - rekombinant DNK lar texnologiyası - genetikalıq strukturalardı birge qosıw texnikası - molekulyar biologiyanın’ en’ a’h’miyetli jetiskenligi esaplanadı. Bul texnologiyadan paydalanıp za’ru’r o’nim (beloktı) qodirovka (kodirlaydigan) etetug’ın DNK molekulasının’ kishkene bir bo’limi-gendi kesip alıw, onın’ jat gen menen kombinatsiyasın jaratıw, son’ıra bul jan’a genomdı sa’ykes (munasib) kletkalarg’a kiritip xozayn kletka DNK sının’ sintez mexanizmi ja’rdeminde ko’p ma’rtebe ko’beytiriw mu’mkin. Jasalma sharayatta rekombinant DNK alıw h’a’m genlerdi klonlaw birinshi ma’rte 1o72- jılda A№Sh alımları Boyer h’a’m Koen ta’repinen a’melge asırılg’an. Bul alımlar E.col8 bakteriyasının’ xromosoma DNK sına h’a’m usı bakteriya plazmidine ayrıqsha ıdıslarda Eco48 restriktaza fermenti menen islew bergen. Plazmid quramında tek 1 dana Eco48 restriktaza fermenti tanıp kesetug’ın arnawlı nukleotidler izbe-izligi bolg’anlıg’ı sebepli ferment plazmidtin’ qalqan sıyaqlı DNK qos shınjırın tek bir orınnan kesip, plazmidti "jabısqaq" ushlı ashıq h’alatqa o’tkizedi. Xromosoma DNK molekulasında Eco48 restriktaza fermenti tanıy alatug’ın arnawlı nukleotidler izbe-izligi qanday bolsa, bul molekula sonday bo’lekke bo’linedi. Ha’r tu’rli o’lshemge iye bolg’an DNK molekulası elektroforez usılı ja’rdeminde ajıratıp alınadı. Ajıratıp alıng’an «jabısqaq" ushlı xromosoma DNK sı bo’legi ashıq h’alatdag’ı "jabısqaq" ushlı plazmid DNK sı menen aralastırılıp, ligaza fermenti ja’rdeminde jabıstırıladı (tigiledi). Na’tiyjede plazmid quramına xromosoma DNK bo’legi kiritiledi. Sol sebepten rekombinant DNKg’a to’mendegishe sıpatlama beriw mu’mkin` h’ar qanday tiri organizm na’sillik molekulasının’ qa’legen bo’legini vektor molekulalarına birigiwden payda bolg’an jasalma DNK rekombinant DNK delinedi. Rekombinant DNK alıwda u’sh konnektor, restriktaza-ligaza h’a’m linker molekulaları usıllarınan paydalanıladı. Konnektor usılında - rekombinatsiyada qatnasıwshı DNK bo’leginin’ e' ushına dezoksinukleotid transferaza fermenti ja’rdeminde belgili uzınlıqtag’ı (oligo) (dA) – segmenti jalg’anadı. Ekinshi ushına bolsa oligo (d5) - segmenti jalg’anadı. Bul DNK bo’lekleri aralastırılg’anda dA h’a’m d5 segmentlerinin’ vodorod baylanısları tiykarında komplementar birigiwi sebepli qalqan sıyaqlı DNK strukturası payda boladı. Payda bolg’an DNK dag’ı bir zınjırlı bos jaylar DNK-polimeraza 8 fermenti ja’rdeminde toltırıladı. Restriktaza ligaza usılı - en’ a’piwayı h’a’m an’sat rekombinant DNK alıw usılı esaplanadı. Bul usılda DNK molekulası h’a’m vektor plazmid "jabısqaq." ushlar payda qılıwshı restriktaza menen kırqıladı h’a’m aralastırılg’an h’alda belgili sharayıtta reassotsiatsiya qılınadı. Komplementarlıq qa’siyetlerge ko’re DNK molekulaları o’z-ara vodorod baylanısları ja’rdeminde birigip qalqan sıyaqlı struktura payda qıladı h’a’m DNK zınjırının’ birikpegen orınları DNK-ligaza fermenti ja’rdeminde baylanadı. Linker molekulalarınan paydalanıw usılında - DNK molekulasına h’a’m vektor plazmidine Tn’ fag DNK-ligaza fermenti ja’rdeminde arnawlı nukleotid izbe-izligine iye bolg’an linker molekula jalg’anadı. Alıng’an eki tu’rdegi DNK molekulası restriktaza fermenti ja’rdeminde qırqılıp aralastırılg’an h’alda reassotsiatsiya qılınadı. DNK h’a’m vektor plazmid molekulalarının’ birikpegen orınları DNK-ligaza fermenti ja’rdeminde jalg’anadı. Usı barısta re- kombinant DNK molekulası payda boladı. 2. Vektor molekulaları. Rekombinant DNK avtonom replikatsiya bolıwı ushın juwap beretug’ın DNK bo’legi vektor molekulaları deyiledi. Vektor molekulalar kletkag’a qosımsha genetikalıq xabar kiritiliwin ta’miynleydi. Vektor molekulalar o’z wazıypasına qarap eki tipge bo’linedi. Birinshisi avtonom replikatsiya bolıwshı vektorlar, ekinshisi xromosomag’a integratsiya bolıwshı vektorlar. Vektor molekulalar gen injenerligi biotexnologiyasında genlerdi klonlawda h’a’m transformatsiya qılıwda tiykarg’ı jumıs quralı bolıp xızmet qıladı. Vektor molekulaları wazıypasın fag DNK ları, plazmidler h’a’m o’simliklerdin’ xloroplast h’a’mde mitoxondriya DNK ları, h’aywan virusları o’tewi mu’mkin. Vektor molekulalarg’a to’mendegishe talaplar qoyıladı. 1. Vektor restriktaza menen islew berilgende qalqa formasınan tuwrı formag’a o’tiwi, og’an basqa DNK biriktirilip ja’ne qalqa formasına qaytıwı h’a’m kletkag’a jiberiliwi ushın bir jaydan kesiwshi restriktazag’a sa’ykes keliwshi sayt (nukleotid izbe-izligine) iye bolıwı za’ru’r. 2. Vektor belgili kletkada replikatsiyalanıwı kerek. 54 3. Vektor molekula quramında marker gen tutıwı za’ru’r, bul gen vektor kletkag’a kirgennen son’ og’an vektor molekulasının’ qatnasqanlıg’ınan derek beriwshi fenotip beredi. 3. Genler bibliotekasını jaratıw h’a’m individual genlerdi ajıratıw texnologiyası. Xojalıq a’h’miyeti qımbatlı bolg’an genlerdi ajıratıw ushın gen bibliotekası du’ziledi. Xromosoma DNK sı tiykarında gen bibliotekasını du’ziw to’mendegishe a’melge asırıladı. DNK h’a’m vektor molekulaları restriktaza fermenti ja’rdeminde qırqıladı h’a’m belgili sharayıtta reassotsiatsiya qılınadı. Nukleotidler arasında jalg’anbay qalg’an boslıq DNK-ligaza fermenti ja’rdeminde o’z-ara biriktiriledi. Alıng’an rekombinant DNK bakteriya kletkasına transformatsiya qılınadı. Xromosoma DNK sında bar genlerdi tolıq klonlaw ushın DNK o’lshemine h’a’m alıng’an klonlardın’ sanına itibar beriw kerek. Bul ko’rsetkish to’mendegi formula ja’rdeminde esaplanadı. y x Ln p Ln N / 1 ( ) 1 ( − − = bunda x-klonlanıp atırg’an DNK o’lshemi, u-gaploid genomnının’ o’lshemi h’a’m r=0,99 g’a ten’ (buja) 99O’ xromosoma DNKsının’ unikal bo’limi klonlanadı. Genlerdi klonlawda ko’binshe DNK bibliotekasını du’ziw maqsetke muwapıq boladı. Bul h’alda arnalg’an poli (Y) h’a’m oligo (d5) kolonkaları ja’rdeminde ushlarında poli (A) nukleotidler izbe-izliligin saqlawshı iRNK tRNK h’a’m rRNK dan ajıratıp alınadı. Alıng’an iRNK molekulası oligo (d5) nukleotidleri menen aralastırılıp reassotsiatsiya qılınadı. Bunda iRNK molekulasının’ poli (A) ushında dA-d5 qos shınjırlı segment payda boladı. Usı eki shınjırlı segmentinin’ oligo (d5) ushı kDNK sintezin a’melge asırıwshı revertaza fermenti ushın praymer (kDNK sintezinin’ baslanıw nuqtası) wazıypasın o’teydi. Sintez qılıng’an kDNK molekulası qısqa ushlı eki shınjırlı struktura menen tamalanadı. k DNK sintezinde matritsa wazıypasın o’tegen iRNK molekulası NaOH menen ıdıraydı, na’tiyjede qısqa eki shınjırlı h’a’m tolıq iRNK molekulasına komplementar bolg’an bir shınjırlı kDNK molekulası payda boladı. Payda bolg’an qısqa eki shınjırlı struktura kDNK nın’ ekinshi shınjırın sintez qılıwda praymer wazıypasın o’teydi. DNK-polimeraza 8 fermenti ja’rdeminde kDNKnın’ ekinshi shınjırı sintez qılınadı. Payda bolg’an kDNKnın’ bir shınjırlı bo’limi S8- nukleaza fermenti ja’rdeminde ıdıraydı (parchalanadi) h’a’m eki shınjırlı kDNK molekulası payda boladı. Usı jol menen payda bolg’an kDNK molekulası vektor molekulalarına jalg’ang’an h’alda klonlanadı. Ha’r eki usıl menen jaratılg’an genom bibliotekasınan individual genlerdi ajıratıp alıw to’mendegishe a’melge asırıladı, yag’nıy rekombinant plazmid denaturatsiya qılınadı (100 0 S temperaturada 5 min., 0,2 N NaOH eritpesinde 15 min.) bir shınjırlı DNK molekulası stabil qozg’almaytug’ın h’alatta turıwı ushın nitrotsellyuloza filtrine biriktiriledi. Alıng’an filtr [- qg’ R] ATF nukleotidi menen go’zlengen (nishonlangan) iRNK molekulası menen gibridizatsiya qılınadı. Molekulyar gibridizatsiya protsessinde filtrge birikken rekombinant DNK molekulasına komnlementarlık nızamlıg’ı tiykarında go’zlengen iRNK molekulaları birigedi. Payda bolg’an gibrid DNK molekulası denaturatsiya qılınıp go’zlengen iRNK molekulası elyutsiya ja’rdeminde ajıratıp alınadı. Alıng’an iRNK molekulası kletkasız belok sintez qılıw sistemasında (diziminde) tekserip ko’riledi. Payda bolg’an belok molekulasının’ identifikatsiya qılıw jolı menen individual genlerdi ajıratıp alıw a’melge asırıladı. Juwmaqlar. Ulıwmalastırıp aytatug’ın bolsaq, gen injenerligi usılları menen anıq, reje tiykarında mikroorganizm, o’simlik h’a’m h’aywanlardın’ jan’a formaların ju’zege keltiriwshi genlerdi konstruktsiya qılıw mu’kin eken. Genler bibliotekasını jaratıw xojalıq a’h’miyetine iye bolg’an genlerdi ajıratıw, olardan individual genlerdi alıw h’a’m vektor molekulalar quramında transformatsiya qılınıwı ushın za’ru’r. SORAWLAR` 1. Rekombinant DNK degende neni tu’sinesiz? 2. Jasalma sharayatta rekombinant DNK alıwg’a kimler tiykar salg’an? 3. Rekombinant DNK alıwdın’ qanday usılları bar? 4. Vektor molekula degen ne? 5. Vektor molekulalarg’a qoyılatug’ın talaplar nelerden ibarat? y. Genler bibliotekasını jaratıwdan maqset ne? L E K 5s İ Ya № a’u’ Kletka injenerligi, a’h’miyeti h’a’m uazıypaları Jobası` 1. Kletka injenerliginin’ a’h’miyeti h’a’m wazıypaları. 55 2. Organ, toqıma h’a’m protoplastı jasalma azıqlıq ortalıqlarda o’siriw. Sterillew usılları. Azıqlıq ortalıqtı tan’lawdın’ tiykarg’ı printsipleri. 3. Kallus toqımasın alıw. 4. Kletka suspenziyası o’z aldına kletklar kulturası. 5. 8n v854o usılı ja’rdeminde jasawg’a beyimlespegen gibridlerdi ko’beytiriw. 6. Kletka selektsiyasının’ a’h’miyeti h’a’m wazıypaları. 7. Ajıratılg’an protoplastlardın’ bir-birine qosıw usılları. 1. Kletka injenerliginin’ a’h’miyeti h’a’m wazıypaları. Kletka biotexnologiyası kletka, toqıma h’a’m protoplastlardın’ kulturalarınan paydalanıwg’a tiykarlang’an. Kletkalardı o’simliklerden ajıratıp, o’simlik organizminen sırtta jasap ko’beyiwi ushın za’ru’r sharayat jaratıw kerek. Ajıratılg’an kletka h’a’m toqımalar kulturasının’ biotexnologiyadag’ı ornın u’sh bag’darda ko’riw mu’mkin. Birinshi bag’dar o’simlik kletkalarının’ meditsina, parfyumeriya h’a’m kosmetika ushın za’ru’r bolg’an o’nimler, xalıq xojalıg’ınan basqa tarmaqları ushın ekilemshi sintez zatları, sterioidlar, glikozidlar, garmonlar, efir mayları islep shıg’arıw qa’siyeti menen baylanıslı. Ekilemshi zatlar jasalma azıqlıq ortalıqlarda o’silgen kallus toqımalarınan alınadı. Kletkalar texnologiyası tiykarında bizin’ sharatımızda o’speytug’ın o’simliklerden jıl boyı o’nim alıp meditsina ushın preparatlar iclep shıg’arıw mu’mkin. Ma’selen, jenshennen tonustı asırıwshı zatlar alıw mu’mkin. Ekinshi bag’dar - ajıratılg’an toqıma kulturaların ko’beytiriw h’a’m virussız na’lsheler (o’simsheler) alıwda paydalanıladı. Bul usıldı o’simliklerdi klonlı mikroko’beytiriw delinedi, bul usıl ja’rdeminde bir jılda bir meristemadan mın’lap o’simlikler alıw mu’mkin. :shinshi bag’dar - izolyatsiyalang’an kletkalardı o’simlikler selektsiyasında qollap, tez rawajlanıwshı, qolaysız sırtqı faktorlarg’a` qurg’aqshılıqqa, topıraqtın’ shorlıg’ı, pa’s h’a’m joqarı temperaturag’a, fitopatogenlerge shıdamlı o’simlikler alıw mu’mkin. Usının’ menen birge bul bag’dar izolyatsiyalang’an protoplastlardı bir birine qosıp somatikalıq gibridler (duragaylar) alıw jolı menen jan’a o’simliklerdi jaratıw imkanın beredi. Gen injenerligi usılları ja’rdeminde izolyatsiyalang’an protoplastlarg’a jat genlerdi kirgiziw, keyinshelik jan’a qa’siyetli o’simlikler alıw, ajıratılg’an shan’lıq (changdon) h’a’m tuxım bu’rtikleri (urugmurtaklarni) jasalma ortalıqta o’siriw gaploidlar alıw, o’nbeytug’ın gibrid tuxımların o’sirib o’simlikler alıw imkanın beredi. Probirkada tuxımlandırıw arqalı bolsa shag’ılıspaytug’ın o’simliklerdi shag’ılıstırıw mu’mkin. 2. Organ, toqıma h’a’m protoplasttın’ jasalma azıqlıq ortalıqta o’siriw h’a’m sterillew usılları. Azıqlıq ortalıqta tan’lawdın’ tiykarg’ı printsipleri. Organ toqıma h’a’m protoplastlardı jasalma sharayatta o’siriw ushın ta’jiriybe deregin h’a’m isletiletug’ın a’sbap u’skenelerdi tolıq sterillew kerek. O’simlikten ajıratılg’an kletka h’a’m toqımalar o’siriletug’ın azıqlıq ortalıqta o’simliklerge kerekli h’a’mme makroelementler` azot, fosfor, kaliy, kaltsiy, ku’kirt, magniy, temir, mikroelementler: bor, Rux, mıs, kobalt, marganets, yod molibden, sonday-aq vitaminler, ugelevodlar, fitogarmonlar, bazı azıqlıq ortalıqlar quramında bolsa kazein gidrolizati h’a’m bazı aminokislotalar bolıwı kerek. Bunnan tısqarı, azıqlıq ortalıq quramına, EDTA (etilen-diamin- tetrasirka kislota) yamasa onın’ natriyli duzı kirgiziliwi kerek. Ajıratılg’an kletka h’a’m toqımalar o’siriletug’ın azıqlıq ortalıqta uglevod deregi sıpatında saxaroza yaki glyukozanın’ 20- 40 g/l mug’darı qollanıladı. Kallus toqımaların alıwda azıqlıq ortalıqlar quramına auksin (kletka dedifferentsirovkasın ju’zege keltiriwshiler) h’a’m tsitokinin (dedifferentsiyalang’an kletkalardın’ bo’liniwin induktsiyalawshı) kirgiziw kerek. Auksin deregi sıpatında azıqlıq ortalıqlarda 2,4-dixlorfenoksisirka kislota (2,4D)F 1-10 mg/l; indolilsirka kislota (İSK)-1-e0 mg/l, α -naftilsirka kislota (NSK)-0,1-2 mg/l sıyaqlılar isletiledi. Ko’binshe 2,4-D isletiledi. İSK 2,4D ke salıstırg’anda e0 ma’rte kem aktivlikke iye. Jasalma azıqlıq ortalıqlarda tsitokinin deregi sıpatında kinetin, y-benzilaminonurin (y-BAP) h’a’m zeatin (0,001-10 mg/l) qollanıladı. №attı azıqlıq ortalıqtı tayarlawda ten’iz suw otlarınan alınatug’ın polisaxarid, agar-agardan (5-7F) paydalanıladı. Ha’r-qıylı tu’rlerge tiyisli o’simlikler kletkaları, toqımaları h’a’m organların o’siriwde tu’rli quramdag’ı azıqlıq ortalıqlarınan paydalanıladı. Ko’binshe Murasiga- Skuga, Uayt, Gamborga (V-5) azıqlıq ortalıqları isletiledi. Murasige-Skuga azıqlıq ortalıqlarınan tu’rlishe modifikatsiyalar menen apikal meristemalar o’siriwi h’a’m o’simlikti mikroko’beytiriwde paydalanıladı. 3. Kallus toqımanı alıw. Ajıratılg’an toqımalar kulturası degende a’dette kallus toqıması yaki isik (shish) toqıması tu’siniledi. Kallus - bul dedifferentsiyalang’an (dedifferentsiatsiya - bala kletkalar arasında, ana h’a’m bala kletkalar arasında ayırmashılıqqa (farqga) alıp keliwshi protsessler kompleksi) kletkalardan 56 ibarat qa’nigelespegen (ixtisoslashmagan) massa. Kallustın’ payda bolıwı h’a’m o’siwi auksin, tsitokinin gruppalarına tiyisli bolg’an fitogarmonlar ta’repinen basqarıladı. Toqımanın’ differentsiyalang’an kletkaları auksin ta’sirinde dedifferentsirovkanı jen’edi, tsitokininler ta’sirinde bolsa aktiv bo’liniwge o’tip, kalluslı toqıma payda qıladı. Kallus toqıması eki tu’rde fitogarmon tutıwshı tu’rli jasalma azıq ortalıqlarda tu’rli organlar eksplantlarında` aseptik o’siwshi tuxımlarda, paqal h’a’m tamır bo’leklerinde, izolyatsiyalang’an parenxima bo’leklerinde, tugunak toqımalarda, izolyatsiyalang’an paqal bu’rtiginde (murtagida), japırag’ında an’sat payda boladı. 8n v854o kallus toqıması tiykarınan aq yamasa sarg’ısh ren’de boladı. Kallus qartaya baslag’anda fenol birikpeleri toplanıwı na’tiyjesinde kon’ır ren’ge kire baslaydı. Kallus toqıması amorf bolıp, anıq anatomiyalıq du’ziliske iye emes. Biraq kelip shıg’ıwına, o’siw sharayatına baylanıslı h’alda boladı. 1. Gewek, o’z aldına mayda agregatlarg’a tez ıdırawshı (parshalanıwshı). 2. Orta tıg’ızlıqtag’ı, meristematik orayı jaqsı ko’rinetug’ın. 3. Tıg’ız, kambiy elementleri differentsiyalanıp atırg’an h’a’m sistemag’a tu’sip atırg’an h’alatta boladı. Ha’r bir kletka o’siwdin’ e fazasınan o’tedi. 1. Bo’liniw, 2. Sozılıw, 3. Differentsirovka. Dedifferentsiyalang’an kletkalar ko’beyiwi qa’nigelespegen ko’beyiwge, na’tiyjede kallus payda bolıwına alıp keledi. Kletkalardın’ 8n v854o differentsiyalang’an h’alattan didiferentsiyalang’an h’alatqa o’tiwi h’a’m kletkalardın’ aktiv bo’liniwi genlerdin’ aktivliginin’ o’zgeriwi menen baylanıslı. Bazı genlerdin’ aktivlesiwi bazılarının’ passivlesiwi kletkanın’ belok quramının’ o’zgeriwine alıp keledi. Kallus kletkalarında spetsifik beloklar payda boladı h’a’m bir waqıttın’ o’zinde japıraqtın’ fotosintezine tiyisli belokları kemeyedi yamasa ulıuma jog’alıp ketedi. Differentsiyalang’an kletkalar dedifferentsiyalanıp kallus payda qılıw protsessinde kletkada bioximiyalıq h’a’m tsitologiyalıq o’zgerisler ju’z beredi. Dedifferentsirovka zapas zatlardan paydalanıp kletka organellalardın’ ıdırawınan baslanadı. Dedifferentsirovka induktsiyasınan y-12 saat o’tkennen son’ kletka qabıg’ı qatayadı (puklashadi) h’a’m isedi, erkin ribosomalar sanı artadı, goldji apparata elementlerinin’ sanı ko’beyedi, yadroshalardın’ o’lshemi u’lkeyedi h’a’m sanı asadı. Kallus kletkası o’zinin’ rawajlanıw tsikline iye. Kallus kletkalarının’ qartayıwı, bo’liniw qa’siyetlerin jog’altpaslıqları ushın eksplantda payda bolg’an birlemshi kallus 4-y h’a’pteden son’ taza azıqlıq ortalıqqa o’tkiziledi. Bul operatsiyanı (muolajani) passirlash delinedi. Turaqlı passirlew jolı menen kletkalardın’ bo’liniw qa’biletin on jıllap saqlap turıw mu’mkin. Kallus kletkaları 8n v854o o’simlik organizmi normal kletkalarg’a ta’n bolg’an fiziologiya-bioximiyalıq qa’siyetlerge iye boladı. Olar ekilemshi metobolitler sintez qılıw qa’biletin saqlap qaladı. Kallus toqımalarının’ joqarı temperaturag’a, osmotikalıq aktiv zatlarg’a shıdamlılıg’ı qa’siyetleri menen normal o’simliklerge uqsas boladı. Kallus kletkaları genetikalıq geterogen esaplanadı. Kallus kletkaları xromosomalar sanı menen parıq kıladı. Meristematikalıq toqımalar 8n v854o genetikalıq turg’ın (turg’un) boladı. Kallus h’a’m suspenziya kulturalarında baslang’ısh o’simlikke ta’n diploid kletkalar toplamın e, 4, 5 h’a’m onnan da ko’plew, xromosoma toplamlı poliploid kletkaların ushıratıw mu’mkin. Onnan tısqarı kallus toqımaları kulturasında aneuploidtı da ushıratıw mu’mkin. Kallus kletkaları qansha uzaq waqıt o’sirilse olar ploidligi menen sonshelli ko’p parıq qıladı. Temeki kallus toqımasın n’ jıl o’sirilgennen son’ diploid kletkalar ulıwma qalmaydi, h’a’mme kletkalar poliploid yaki aneuploid boladı. 4. Kletka suspenziyası h’a’m ayırıqsha kletkalar kulturası. Kletkalar suspenziyası kallusın suyıq azıqlıq ortalıqqa salıp, barqulla shayqatıp aralastırıw jolı menen alınadı. Eksplantdan pektinaza fermentinen paydalanıp susnenzion kultura alıw mu’mkin. Aldın eksplant ju’zinde kallus toqıması payda qılınadı son’ onnan o’z aldına kletkalar h’a’m kletka agregatları alınadı na’tiyjede kletka suspenziyası payda boladı. 100 ml suspenziya alıw ushın 2-e g taza kallus toqıması kerek boladı. Suspenzion kletkalardın’ bo’liniwi kallus kletkaları induktsiyası h’a’m o’siwi ushın za’ru’r bolg’an garmonlar auksin, tsitokininler qatnasında baradı. Suspenziya 2,4D lı azıqlıq ortalıqta o’sirilgen geuek pwk kallusdan jaqsıraq payda boladı. Kletka suspenziyası biotexnologiyada qımbatlı da’ri preparatlar bolg’an ekilemshi metobolitler alıwda, kletka biomassasın sanaatta o’siriwde h’a’m kletka selektsiyasında, sonın’ 57 menen birgelikde izolyatsiyalang’an protoplastlardı alıwda baslang’ısh material sıpatında paydalanıladı. Kletka suspenziyası menen islegende olardın’ xarakteristikasın` jasaw qa’biletin, suspenzion kulturadagı tıg’ızlıg’ın, agregirleniw da’rejesi, o’siw tezligin biliw za’ru’r. Jasaw qa’biletin olardı boyap anıqlanadı. Bunda metil ko’k yamasa Evans ko’k boyawı isletiledi. Bunda tiri kletkalar boyalmaydı, nabıt bolg’an kletkalar ko’k ren’ge boyaladı. Genetikalıq h’a’m fiziologiyalıq izleniwler ushın, sonday aq kletka selektsiyasında paydalanıw ushın bo’lek kletkalardı o’siriw u’lken a’h’miyetke iye. Bo’lek kletkalardan alıng’an klon-a’wladlar genetikalıq bir qıylı emesliginin’ sebeblerin biliwde ja’rdem beredi. 5. 8n v854o usılı ja’rdeminde jasawg’a beyimlespegen duragaylardı ko’beytiriw. Kletka texnologiyasının’ ja’ne bir bag’ıtı bul kletka texnologiyasınan selektsiyadan paydalanıw esaplanadı. Bul usıldan paydalanıp, selektsiya protsesslerin tezlestiriw h’a’m an’satlastırıw, o’simliklerdin’ taza formaların h’a’m sortların jaratıw mu’mkin. Ajıratılg’an kletka h’a’m tuxımlardı 8n v854o o’siriwdi eki gruppag’a bo’liw mu’mkin. 1-topar. Bul ja’rdemshi texnologiya bolıp, selektsiyanın’ ornın basa almaydı, biraq og’an xızmet qıladı. Bug’an 8n v854o tuxımlandırıw, tuxım bu’rtigin (urugmurtakni) h’a’m jetilmegen gibrid bu’rtiklerin (murtaklarni) o’siriw, shan’lıq h’a’m mikrosporalardı o’sirip gaploid alıw, ajıratılg’an kletkalardı kriosaklaw, bo’lek gibridlerdi klonal mikroko’beytiriwdi kirgiziw mu’mkin. 2-topar. Bul selektsiyanın’ milliy (ananaviy) usıllarınan parıq kılıwshı usıllar menen o’simliklerdin’ taza forma h’a’m sortların alıw` kallus toqımasınan paydalanıp kletka selektsiyası, somatikalıq gibridizatsiya, gen injenerligi usılların qollaw. O’simlikler selektsiyasında 8n v854o usılınan ja’rdemshi usıl sıpatında paydalanıw. Tan’lang’an juplardı tabiyg’ıy sharayattda tuxımlandırıw mu’mkin bolmag’an h’allarda 8n v854o tuxımlandırıw usılınan paydalanıladı. 8n v854o tuxımlandırıwdı eki tu’rli jol menen a’melge asırıw mu’mkin. 1. Tu’yin (tuguncha) sırtına shan’ qoyılg’an h’alda jasalma agarlı ortalıqlarda o’siriledi. 2. Tu’yindi (tugunchani) jarıp azıqlıq ortalıqqa tuxımbu’rtikli (urugmurtakli) platsenta bo’legi jaylastırıladı og’an jaqınıraq jayda yamasa platsenta toqımasında tayar shan’ o’siriledi. Tuxımlanıw ketken-ketpegenligin tuxımbu’rtikler (urugmurtaklar) o’lsheminin’ tezlikte o’siwinen anıqlaw mu’mkin. Formalang’an bu’rtik (murtak) tınısh h’alatqa o’tpesten, tezde o’sip gibrid a’wladının’ o’siwi baslanadı. Postgam shag’ılıspawshılıqtı (chatishmaslikni) jen’iw. Postgam shag’ılıspawshılıq shan’lang’annan son’ kelip shıg’adı. Bunda rawajlanbag’an, push, o’nbeytug’ın tuxımlar payda boladı. Bug’an sebeb bu’rtik (murtak) benen endospermanın’ rawajlanıw waqtının’ tuwrı kelmesligi bolıwı mu’mkin. Endosperma jaman rawajlang’anda bu’rtik (murtak) normal o’speydi. Bunday h’allarda jetilgen push tuxımlardan bu’rtikshe (murtak) ajıratıp alınadı h’a’m azıqlıq ortalıqta o’siriledi. Bu’rtikshelerdi (murtaklarni) jasalma azıqlıq ortalıqta o’siriw embriokultura dep ataladı. Jetilgen bu’rtikshelerdi (murtaklarni) mineral duzlar h’a’m saxaroza tutıwshı fiziologiyalıq aktiv zatlar salınbag’an a’piwayı azıqlıq ortalıqta o’siriw mu’mkin. Embriokulturalardı selektsiyada awıl xojalıq o’simliklerinen uzaq gibridler (duragaylar) alıwda, qollaw h’a’zirgi ku’nde u’lken a’h’miyetke iye bolmaqta. Ajıratılg’an bu’rtiksheler (murtaklar) kulturası ja’rdemshi usıl sıpatında uzaq gibridlewde (duragaylawda) tek g’ana postgam shag’ılıspawdı jen’iwde g’ana emes al qımbatlı gibrilerdi mikroko’beytiriwdede paydalanıladı. Mikrokobeytiriw kallus toqımalarınan kallusogenez, morfogenezdin’ induktsiyası h’a’m regenerant o’simlik alıw jolı baradı. 8n v854o gaploidlar alıw, olardı selektsiyada qollaw. Gaploid o’simliklerden paydalanıp kerekli kombinatsiyalardı tezirek tabıw, qısqa waqıt ishinde sort jaratıw mu’mkin. Gaploidlar stabil gomozigot dizimler (sistema, tizim) alıwda isletiledi. Gaploid tiykarlar sterillengen, biraq olardın’ xromosomalar toplamın kolxitsin ja’rdeminde eki ma’rte ko’beytiriw mu’mkin h’a’m diploid gomozigot o’simlikler alıw mu’mkin. Kallus toqımasınan regenerant o’simlik alıw texnologiyası islep shıg’ılg’annan son’ baslang’ısh o’simlikten fenotipik h’a’m genotipik qa’siyetleri menen parıq qılıwshı o’simliklerdin’ jan’a formaların jaratıw imkaniyatı payda boldı Bul «somaklon» dep atala basladı. y. Kletka selektsiyasının’ a’h’miyeti h’a’m wazıypaları. Somaklonlar (somaklon-o’sirilip atırg’an kletkalardın’ qa’legen formasınan o’simlik alıw) alıwdı kletka selektsiyası menen birgelikte alıp barılsa jaqsı na’tiyjelerge erisiw mu’mkii. Kletka selektsiyasını to’mendegi usıllar menen a’melge asırıw mu’mkin. 58 -tuwrı selektsiya (pozitiv), bunda kletkanın’ ma’lim o’z aldına (aloh’ida) mutantlari jasawı kerek. -tuwrı emes (negativ) selektsiya, bo’linip atırg’an jabayı tip kletkalardı tan’lap joq etiwge h’a’m metobolitik aktiv bolmag’an kletkalardın’ jasap ketiwine, biraq olarda mutatsion o’zgerislerdin’ qosımsha ideitifikatsiyasına tiykarlang’an. -ulıwma selektsiya, bunda h’a’mme kletka klonlari o’z aldına u’yreniledi. -ju’zeki (yuzaki) selektsiya h’a’m selektiv emes (noselektiv) tan’law, dizim variantları h’a’mme populyatsiyalar ishinen ko’rinisine qarap yamasa bioximiyalıq usıllar arqalı anıqlanadı. Joqarıda aytılg’an usıllardan tuwrı selektsiya ko’plew, tarqalg’an usıllardan bolıp, gerbitsidlerge, antibiotiklerge, toksinlerge, awır metallarg’a, duzlarg’a h’a’m basqa antimetobolitlerge shıdamlı regenerant o’simlikler alıwda paydalanıladı. 7. Ajıratılg’an protoplastlardın’ bir-birine qosıw usılları. Kletka selektsiyası islerini a’melge asırıw ushın kallus, kulturalar suspenziyası yamasa ajıratılg’an protoplastlardan paydalanıw mu’mkin. Kletka selektsiyasının’ keyingi usılı bul somatik kletkalardan alıng’an protoplastlardın’ qosılıwı esaplanadı. Bul usıl a’piwayı jınısıy jol menen shag’ılıstırıw mu’mkin bolmag’an o’simliklerdin’ filogenetikalıq uzaq, tu’rlerin shag’ılıstırıw imkaniyatın beredi. Protoplast - bul pektin tsellyulozalı qabıqtan ayırılg’an (maxrum etilgen) tiri kletka esaplanadı. Ha’zirgi waqıtta protoplastlardı o’simliklerdin’ tu’rli organları toqımalarınan` tamır, japıraq, gu’l h’a’m miywelerinen, kartoshka tu’yneginen (tuganagidan), tu’rli isiklerden (shishlardan) h’a’m mikrosporalardan ajıratıp alıw mu’mkin. Pektolitik, tsellyulitik fermentler h’a’m osmotikalıq aktiv zatlar eritpeleri menen protoplastlardı zıyanlamastan kletka diywalın ıdıratıwg’a erisiw mu’mkin. Eger ajıratılg’an protoplastlar azıqlıq ortalıqlarg’a egilse e-4 ku’nnen son’ ja’ne kletka diywalı tiklenip, kletkalar bo’liniwge o’tedi. 12-14-ku’ni h’a’mme kletkalar mikrokoloniyalarg’a aylanadı. 20-40 kletkalardan ibarat mikrokoloniyalar taza azıqlıq ortalıqqa o’tkiziledi, ol jerde olar kallus payda qıladı. Usı kalluslardan regenerant o’simlik alıw mu’mkin. Ajıratılg’an protoplastlar qosılıw qa’siyetine iye. Bir qıylı o’simlikler protoplastı, h’a’r qıylı tu’rge tiyisli o’simlikler protoplastı h’a’m tu’rli semyag’a tiyisli o’simlikler protoplastları menen qosılıwı mu’mkin. Protoplastlardın’ qosılıwınan gibridler yamasa tsibridler payda boladı Tsibrid kletka eki partnerdin’ tsitoplazmasına, birewinin’ yadrosına iye boladı. Tsibridizatsiya tsitoplazma TsMS qa’siyetlerine iye bolg’an genlerdi, bazı gerbitsid h’a’m patogenlerge shıdamlılıq genlerin o’tkiziw imkanın beredi. Download 5.81 Kb. Do'stlaringiz bilan baham: |
Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling
ma'muriyatiga murojaat qiling