Pharmaceutical Microbiology Manual

F
OOD AND 
D
RUG 
A
DMINISTRATION
 
O
FFICE OF 
R
EGULATORY 
A
FFAIRS
 
Office of Regulatory Science
 
Document Number: 
ORA.007 
Revision #: 02 
Revised: 
25 Aug 2020 
Title:
Pharmaceutical Microbiology Manual 
Page 65 of 92
For the most current and official copy, check QMiS. 
b. Apply swab (or sponge with handle) to surface (or equipment) 
being monitored with firm application pressure.
c. When sampling (monitoring) flat surfaces allow the swab (or 
sponge with handle) to firmly rub an area of approximately 24 to 
30 cm
2
. 
d. Apply the swab (or sponge) within this contact area in both a 
horizontal and vertical direction for approximately 10 seconds. 
e. Place the swab (or sponge) back into the carrier container (if it 
came with one) and place into the additional sterile Whirl-pak
® 
bag. Be sure to break off the handle portion of the sponge 
applicator stick. 
3. Quantitative RODAC/Hycheck Sampling 
a. Carefully remove the lid of RODAC plate or loosen the cap on 
the Hycheck slide tube. Take care not to touch the agar surface. 
Note: Examine agar for contamination and or dehydration 
b. Gently but firmly touch the RODAC agar surface against the area 
being sampled, exert moderate, even, vertical pressure and then 
carefully replace lid. Avoid using rubbing motions of the plate at 
the sample site as this may break the agar. 
c. When using Hycheck press down on the spike to bend the 
paddle at the hinge line gently lowering the slide and press the 
agar to the surface with firm and even pressure. Repeat this step 
using the 2
nd 
agar surface on an area adjacent to the initial test 
site. Replace slide in container and close tightly. 
4. Sampling of Irregular Surfaces 
A classified area may have an exposed irregular surface (i.e. particle board, 
wood, broken laminate, etc.) that requires sampling. In these situations, a 
colorless transport media such as letheen broth, saline or sterile water should 
be used to wet the sponge or swab prior to sampling. The microbiologist 
should avoid the use of D/E neutralizing broth which is a dark purple color and 
may discolor the irregular surface.
At the microbiologist’s discretion, it may be determined that a RODAC plate 
should be used to sample the irregular surface. In this situation, a RODAC 
plate comprised of colorless agar such as tryptic soy agar would be 
appropriate. A colored agar such as D/E agar should be avoided. 
5. Place the EM sample into a sterile Whirl-pak
® 
bag and identify the 
bag immediately after. 

---