Statik biokimyо

52-tajriba.Me'da shirasi tarkibidagi pepsin va siydik tarkibidagi uropepsin faolligini 
miqdoriy aniqlash. 
Me'da shirasi tarkibidagi pepsin sut oqsili – kazeinogenni ivitish xossasiga ega (pH = 
4,9). 25 
0
C da sut-atsetat aralashmasining pepsin ta'sirida ivishi oqsilning singish vaqtiga to‘g‘ri 
keladi. Pepsinning faollik birligi qilib 5 ml sut-atsetat aralashmasining 60 daqiqada ivitadagan 
miqdori olinadi (ushbu nisbiy birlik 0,010 mg kristall pepsinga to‘g‘ri keladi). Me'da shirasining 
1 ml da 40 – 60 pepsin birligi bor. Siydik tarkibidagi uropepsinning faolligi yuqoridagidek 
aniqlanadi. 
Kerakli asbob va reaktivlar: termostat, suv hammomi, sekundomer, mikroskop, 
termometr, probirkalar, shtativlar, atsetat bufer (pH = 4,9) eritmasi (45 g NaOH avval 400-500 
ml suvda eritiladi, so‘ng sovitiladi. Uni 1 litrli kolbaga solib, 115 ml muzli sirka qo‘shiladi va 
hajmi 1 l ga olib boriladi), vodorod xloridning 2 M eritmasi, pepsinning doimiy standart eritmasi 
(100 mg kristall pepsin 100 ml 0,2 % li vodorod xloridda eritiladi), me'da shirasi yoki pepsin 
eritmasi, siydik.
 
Ishning bajarilishi.
1. Probirkaga 0,1 ml me'da shirasi, ustiga 5 ml sut-atsetat aralashmasi solinadi. Ikkala 
probirka 25 
0
C gacha isitilgan suv hammomiga 5 daqiqaga quyiladi. So‘ng sut-atsetat 
aralashmasi tezda me'da shirasi solingan probirkaga olinadi va sekundomerda o‘lchanadi, 
probirkadagi eritmalar silkitiladi. Aralashmali probirka egilgan holda suv hammomida ushlanadi 
va probirka devorida kazein ivitmasi hosil bo‘lishi kuzatiladi. Iviq hosil bo‘lgan zahoti 
sekundomer to‘xtatiladi va iviq hosil bo‘lgan vaqt yozib olinadi. 
Hisoblash. 1 ml me'da shirasi tarkibidagi pepsin faolligini hisoblash uchun 60 soni 
topilgan vaqt soniga bo‘linadi. Shu o‘l bilan 0,1 ml me'da shirasi tarkibidagi pepsinning miqdori 
birligi topiladi. Shu son 10 ga ko‘paytirilganda 1 ml me'da shirasi uchun pepsin faolligi topiladi. 
Masalan, sut-atsetat aralashmasida birinchi iviq hosil bo‘lishi 15 daqiqada aniqlandi. Demak, 
60:15=4,0 birlik. 1 ml uchun esa 4,0×10 =40,0 yoki bu 40,01 mg = 0,4 mg kristallik pepsin 
faolligiga to‘g‘ri keladi.