Tibbiyot institutlаri tаlаbаlаri uchun o‘quv аdаbiyoti r. G‘. Sultоnоv, N. M. Хоlmuhаmmеdоvа, sh. F. Karimova, U. L. Sultonho‘jaev biоkimyodаn


Download 1.3 Mb.
Pdf ko'rish
bet126/233
Sana04.02.2023
Hajmi1.3 Mb.
#1164752
1   ...   122   123   124   125   126   127   128   129   ...   233
Bog'liq
Biоkimyodаn аmаliy mаshg‘ulоtlаr doc

Tekshiriluvshi material: qon zardobi (uni 5-6 kungacha sovitgishda saqlash mumkin).
Reaktivlar. Tric (trioksimetileneminimetanxlorgidrat), N, N¹- (TEMED), xlorid kislotaning 1 mol/l
eritmasi, ammoniy perioksidisulfatning 140 mg/dl eritmasi, saxaroza, qora sudan “V” ning etil spirtda
tayorlangan to‘yingan eritmasi (100 mg qora sudan “V” 5 ml spirtda eritiladi). pH i 8,8 bo‘lgan tris-glitsin
buffer eritmasi.
Kerakli anjomlar. Elektroforez uchun asbob, shihsa naychalar, paster pipetkalari, shpritslar.
Bajariladigan 
ish 
tartibi.
1. 
Elektroforez 
o‘tkazishga 
tayyorlanish.
O‘tkazuvchiligi bilan farqlanadigan 3 qavatli geltayorlanadi. 2. Ushbu eritmalarni


124
ishlatishdan oldin sovitgichdan olinadi va xona haroratigacha istiladi. Tozalab
yuvilgan shisha naychalar vertical holda shtativga o‘rnatiladi. Shisha naychalarining
pastki qismi rezina qopqoq bilan berkitiladi.
3. Pastki 10% li gek eritmasi, 1 hajm A; 2,8 hajm B, 02 hajm H
2
O va 4 hajm
ammoniy peroksosulfat eritmalarini aralashtirish yo‘li bilan tayyorlanadi.
Tayyorlangan eritma Paster pipetkasi yordamida asta-sekin shisha nayning 200 ml
balandligigicha (naychaning pastki o‘lchov belgisigacha) solinadi. So‘ngra har qaysi
naychaning gel yuqorisiga ikki gel orasida belgi hosil bo‘lmasligi uchun devor
bo‘ylab distillangan suv qavatlanadi (gel aralashmasiga kerak). Gellar polimerlanishi
uchun naychalar xona haroratida 15-20 daqiqa saqlanadi.
4. Navbatdagi (5%) gelni tayyorlash uchun, 1 hajm A; 1,36 hajm B; 1,64 hajm
suv va 4 hajm ammoniy peroksosulfat aralashtiriladi. Bu eritma naychaga Paster
pipetkasi yordamida 15 ml balandlikda solinadi (naychaning ikkinci o‘lchov belgisi).
Uning ustiga devor bo‘ylab suv solinadi. Gelning ikkala qavati xona haroratida 30
daqiqa davomida polimerlanadi. So‘ngra suv chayqatish yo‘li bilan olib tashlanadi.
Ikkala gel kichik teshikchali bo‘ladi.
5. 3% li gel qavatlanadi. Buning uchun 1 hajm A; 2 hajmB; 1 hajm D; 4 hajm
G eritmalari aralashtiriladi. Bu eritma shisha naychaga solinadi. Bu qavatning
balandligi 20 mm. Gel yuqorisidan suv qavatlanadi. Gel xona haroratida 30 daqiqa
polimerlanadi. Suv yuqoridagidek chayqatish yo‘li bilan olib tashlaniladi.

Download 1.3 Mb.

Do'stlaringiz bilan baham:
1   ...   122   123   124   125   126   127   128   129   ...   233




Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling