12. Hujayra yoki to’qimadan fermentni toza holda ajratib olish bosqichlarini yozing.
Ҳужайра ичидаги ва ҳужайра ташқарисига чиқадиган ферментларни
ажратиб олиш ва уларни тозалашни дастлабки босқичида жуда ҳам
катта фарқ бор. Биомассани культурал суюқликдаги метаболитлардан,
жумладан ҳужайра ташқарисига чиққан ферментлардан ажратиш
жараёни унчалик мураккаб бўлмасдан, центрафуга, сепаратор ҳаттоки
оддий фильтрлаш (замбуруғлар учун) орқали амалга оширилади.
Оқибатда кимёвий таркиби бўйича хилма-хил метаболитлар сақловчи
культурал суюқликни фильтрати биомассадан ажратиб олинади.
• Одатда, фильтрат ажратиладиган ферментни 80%га яқинроқ бўлган
фаоллигини сақлайди ва кейинги технологик манипуляцияларга тайёр
эритма ҳисобланади. Ҳужайра ичидаги ферментларни ажратиб олиш
учун биомасса, унда сорбция бўлиб қолган компонентлардан тозалаш
учун дистилланган сув ёки жуда ҳам суюлтирилган буфер билан бир
неча маротаба ювиб ташланади.
• Ҳужайра структурасини бузиб, ичидаги ферментларни ажратиб
олиш учун ҳар хил усуллардан фойдаланилади: механик (шарикчалар
ёрдамида бузиш; кварц қумлари билан артиш), физик (ультратовуш,
гидравлик қимирлатиш, музлатиб-эритиш) ва бошқалар. Бузилган
биомассадан ферментни рН кўрсаткичи ферментга тўғри келадиган
суюлтирилган буфер ёрдамида амалга оширилади. Ҳужайрани
бузилган қисмлари центрафуга ёрдамида ажратилади. Нуклеин
кислоталар ферментлар ёрдамида парчаланади ёки юқори молекулали
катионлар ёрдамида чўктирилади. Бу операция айниқса нуклеин
кислотаси кўпроқ бўлган бактериялар ва ачитқилардан (уларда нуклеин
кислоталар миқдори биомассадан 8-12% ни ташкил қилади) фермент
ажратишда албатта қўлланилади.
13. Oksidoreduktazalar sinfi. Alkogoldegidrogenaza fermenti ishtirokidagi reaksiyani yozing.
Оксидоредуктазалар – оксидланиш-қайтарилиш реакцияларини амалга ошириш, H ва O ни ўтказиш (масалан, каталаза, пероксидаза) .
Do'stlaringiz bilan baham: |
