Микробиология вирусология ва иммунология фанидан даволаш,тиббий педагигика факультетлари талабалари учун амлий куникмаларни к

Иммун системага бахо бериш усуллари. Юкумли касалликларга бахо бериш
усуллари.
Иммун танкислик холатларига бахо беришда Бутун дунё согликни саклаш бошкармаси тавсиясига икки боскичда олиб борилади.
Биринчи боскичда организмнинг умумий иммун холатига бахо берилади, яъни кон ва биологик суюкликлардаги лизоцим, комплемент микдорини аниқлаш. Фагоцитоз системасига бахо бериш. Ҳужайра типидаги иммун жавобга бахо бериш учун Т-лимфоцитларни периферик кондаги умумий фоизи ва абсолют микдорини аниқлаш, гумарал иммун жавобда В-лимфоцитларни кондаги фоизи ва абсолют микдори, лимфоцитларни умумий микдорини аниқлаш шулар жумласига киради. Юқорида келтирилган аниқлаш усуллари билан иммун танкислик холатига бахо бериш мумкин.
Иккинчи даражали аниқлаш усуллари эса иммун система ва унинг алохида тизимларига уларда руй берган турли узгаришларга бахо берилади. Буларга киради: Т ва В лимфоцитларни субпопуляцияларини аниқлаш, табий қиллер ҳужайраларни ва уларни функционал хусусиятларини ўрганишлар киради. Бундан ташкари лимфоцит ҳужайралар ишлаб чикарувчи медиаторлар (ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-6) лимфокинлар, иммуноглобулинлар шулар жумласига киради.
Т-лимфоцитларга бахо бериш.
Т-лимфоцитларга бахо беришда Т - лимфоцитларни мембранасидаги рецепторлар, маркёрлар ва Т-лимфоцитларни антигенлари асос қилиб олинади. Т-лимфоцитларни куй эритроцити (КЭ) билан розетка ҳосил қилиш билан аниқлаш
5
реакциясини мохияти шундан иборатки, Т-лимфоцитлар уз мембранасида КЭ карши рецепторлар тЎтади, бу рецепторлар КЭ бириктириб олиб розетка ҳосил қилиши мумкин. Шуни таъкидлаш лозимки, Т ва В лимфоцит ва уларни субпопуляциясига бахо беришда лимфоцитларни периферик кондан узларини алохида ажратиб олинади, akfr холда бошка ок кон ҳужайралари хам куплаб рецепторлар тЎтади. Бу эса реакцияларни ишонарли бўлиши ни йукотади.
Лимфоцитларни периферик кондан градент зичлик ёрдамида ажратиб олиш.
Кон градент зичлик лимфоцит 4-5 мл Тирсак венасидан 4-5 мл кон олиниб, гепарин билан аралаштиради. (ивимаслиги учун). Градент зичлик тайёрланилади., бунинг учун фекал дистилланган сувда 9,0 гр. 100 мл. сувда эритилади ва тайёр фекал суюклигига верографин кушилади, аралашмани зичлиги 1077 бўлиши керак. тайёрланган градент зичлик суюклигига секин аста кон юзасига куйилади. (аралашиб кетмаслиги керак). пробирка центрифугада 1500 айланма тезликда 1 минут да 1 соат айлантирилади. Лимфоцитларни солиштирма оғирлиги 1077 дан кичик булмаслиги учун гентерфаза колади, лимфоцитларни секин пастер пепидкаси ёрдамида суриб олиниб, уч маротаба 800 об/мин 5 минут 199 мухит билан ювилади ва 1 мл 2 млн. ҳужайра микдорига етказилади.
Т- лимфоцитларни моноклонал антителлалар ёрдамида аниқлаш хозирги кунда Т-лимфоцитларни мембрана маркёрларига карши махсус моноклонал антителлалар чикарилади. СДз⁺ - умумий Т-лимфоцитларни аниклайди, СД4 Т-хелпер индукторларни СД₈⁺ - Т-супрессор ва цитотоксик Т-лимфоцитларни аниклайди.
Т-лимфоцитларни аниқлаш.
Колган субпопуляциялари хам шу курсатилган тарзда аникланади. Хозирги кунда Т-лимфоцитларни субпопуляцияларини аниқлашда билвосита разетка ҳосил қилиш усули билан аникланмокда. Бу усулда хам моноклонал антителлалар кулланилади. Реакцияни мохияти шундан иборатки, эритроцитларга моноклонал антителла СгС1₂ ёрдамида мембранасига тиқилади ва турли куринишда моноклонал антиген тутувчи эритроцит диогностикум тайёр ланади.
Реакция олидинги куйилган разетка ҳосил қилишга ухшаш йуналишда олиб борилади. Хар бир субпопуляция учун махсус моноклонал антителла буктирилган ЭД фойдаланилади. Реакцияни куйиш схемаси:
Юқорида келтирилган усуллар билан иммун комплемент ҳужайраларни хамма субполуляцияларини аниқлаш мумкин.