Pharmaceutical Microbiology Manual

F
OOD AND 
D
RUG 
A
DMINISTRATION
 
O
FFICE OF 
R
EGULATORY 
A
FFAIRS
 
Office of Regulatory Science
 
Document Number: 
ORA.007 
Revision #: 02 
Revised: 
25 Aug 2020 
Title:
Pharmaceutical Microbiology Manual 
Page 39 of 92
For the most current and official copy, check QMiS. 
rinse solution in the 20 x 150 mm tubes. Do not allow the 
water in the sonicator to exceed 38°C. 
viii. Vortex the tubes for 2 minutes. Remove a portion of the 
eluate (5 – 10 mL) for LAL testing. If the eluates are not 
tested immediately for endotoxin, they should be refrigerated.
All eluates must be tested within 24 hours of extraction. Prior 
to analysis vortex at least one minute.
2. Alternative Diluent Examples (Verify prior to use): 
Diluent/Buffer 
Interfering Factor 
Pyrosperse
™
Endotoxin Binding or Masking 
Β-G-Blocker® 
Enhancement due to β-glucans 
Tris Buffer 50mM solution 
Strongly Acidic (pH < 6) or Basic 
(pH > 8) 
Magnesium chloride (MgCL
2
) 
10mM solution 
Chelating 
Note: Always use LRW as the diluent for the CSE standard serial dilutions. 
3. Test the sample eluate from the medical device extraction, using the 
bacterial endotoxins test (BET) assay parameters, procedures, 
standards, and controls for the gel-clot, kinetic chromogenic or 
turbidimetric, or endpoint assays, as directed in USP<85> and 
USP<161>. 
D. Endotoxin References 
1. United States Pharmacopeia (USP) Chapter <85> Bacteria 
Endotoxins Test. Official, Current Version. 
2. USP <161> Medical Devices – Bacterial Endotoxin and Pyrogen 
Tests, Current
Version.