Методические указания по выполнению лабораторных работ Направление подготовки

Оборудование и биологические объекты 
1. Соки в упаковках. 
2. Питательные среды для микроорганизмов и физиологический раствор. 
3. Стеклянная посуда. 
4. Дозаторы объёмом 0,1-1 мл. 
5. Термостаты на 37 ºС и 24 ºС. 
6. Водяная баня. 
7. Газовые горелки. 
8. Спирт, вата, маркер, ножницы, штатив для пробирок. 
ВТОРОЙ ДЕНЬ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА СОКА 
Принцип метода. Определённые объёмы сока высевают на плотные питательные среды. 
Ход анализа. 
1. Распределиться на две группы. Каждой группе выбрать чашки Петри с посевами, 
сделанными на прошлом занятии. 
2. Установить принадлежность выросших на лактобакагаре микробных культур 
к молочнокислым 
бактериям 
по 
культуральным, 
морфологическим 
и 
биохимическим признакам. 
А. Для определения культуральных признаков необходимо изучить микробные 
колонии. 
Для молочнокислых стрептококков характерны: 
– на поверхности среды - круглые, выпуклые, непрозрачные, среднего размера 
колонии с гладкой поверхностью и ровным краем; 
– в слое среды – линзовидной формы колонии. 
Для молочнокислых палочек характерны: 
– на поверхности среды – неправильной формы, плоские, прозрач-ные, среднего 
размера колонии с шероховатой поверхностью и изрезанным краем, т.е. 
звёздообразные; 
– в слое среды – линзовидной формы колонии. 

---

37 
Б. Для определения морфологических признаков провести микроскопию микробов 
с окраской по методу Грама. 
Молочнокислые палочки: грамположительные, крупные, спор не образуют. 
Молочнокислые стрептококки: грамположительные, одиночно расположенные 
или в виде цепочек. 
В. Для определения биохимических признаков поставить реакцию на наличие 
у микробов фермента каталазы. Для этого на выросшую в чашке Петри 
микробную колонию нанести каплю 3%-го раствора перекиси водорода. 
При наличии каталазы перекись разлагается с образованием пены. 
Молочнокислые микроорганизмы каталазы не образуют, т.е. каталазо-
отрицательные. 
3. Установить принадлежность выросших на агаре Сабуро микробных культур к грибам 
по культуральным, морфологическим признакам. 
А. Для определения культуральных признаков необходимо изучить микробные 
колонии. 
Для дрожжей характерны: 
– на поверхности среды - круглые, выпуклые, непрозрачные, белые, среднего 
размера колонии с гладкой поверхностью и ровным краем; 
– в слое среды – линзовидной формы колонии. 
Для плесневых грибов характерны: 
– на поверхности среды – круглые, выпуклые, непрозрачные, цветные колонии 
с ворсистой поверхностью; 
– в слое среды – колонии с отростками мицелия. 
Б. Для определения морфологических признаков провести микроскопию дрожжей 
с окраской метиленовым голубым и использованием масляной иммерсионной 
системой микроскопа. 
Дрожжи образуют крупные овальные клетки. 
4. Провести подсчёт количества колоний молочнокислых бактерий, дрожжей и 
плесеневых грибов на чашках Петри с питательной средой и рассчитать количество 
КОЕ / 1 мл сока. Для работы использовать только чашки Петри с количеством 
колоний от 10 до 300. Подсчитанное число колоний необходимо умножить 
на степень разведения сока перед посевом. Результаты занести в тетрадь. 
5. Сформулировать в тетради выводы о соответствии исследованных соков 
требованиям СанПиН.