Islom karimov nomidagi toshkent davlat texnika universiteti oziq-ovqat kimyosi va biokimyosi
Download 1.1 Mb. Pdf ko'rish
|
Oziq ovqat kimyosi va biokimyosi fanidan laboratoriyaishlarini
- Bu sahifa navigatsiya:
- II. α- amilazaning dekstrinlanish qobiliyatini aniqlash
|
Reaktiv va asboblar:
1) 0,1 n HCl eritmasi; 2) 0,15M Na 2 HPO 4 eritmasi; 3) pH 5,6 bufer eritmasi; 4) 1/4000 n yod eritmasi; 5) 20% HCl erimasi. 25 Ishning bajarilishi: I. α- va β- amilazalar eritmalarini tayyorlash: Amilaza fermentlarini undirilgan arpadan ajratib olish uchun, spool hovonchaga 20 g undirilgan arpa solinadi. Ustiga 100 ml suv quyib, 15 minut davomida aralashtirilib eziladi. Aralashma 2 soatga sovutgichga quyiladi. So„ngra aralashma mato filtrdan siqib, suyuqlik qogʻoz filtrdan yana bir marta oʻtkaziladi. Filtrat α- va β-amilaza fermentlari eritmasidir. Faqat α-amilazali eritma tayyorlash uchun yuqorida tayyorlangan eritmaning yarmi olinadi va 70 ᴏ C li (bu temperatura aniq saqlanishi shart) suv hammomida 15 minut ushlab turiladi. So„ngra eritma sovutilib, kraxmalni dekstrinlashda ishlatiladi. Faqat β- amilazali eritma tayyorlash uchun fermentlar aralashmasi eritmasidan 15 ml olib, ustiga 3 ml 0,1 n HCl eritmasi va 12 ml distillangan suv quyiladi (bunda eritmaning muhiti pH=3,3 bo„ladi). Stakan 15 minutga sovutgichga quyiladi. So„ngra eritmaga 6 ml 0,15 M Na 2 HPO 4 eritmasi qo„shilib, pH=6 ga yetkaziladi. Eritma kraxmalni maltozalarga parchalashda ishlatilishi mumkin. II. α- amilazaning dekstrinlanish qobiliyatini aniqlash α-amilazaning kraxmalni dekstrinlarga gidrolizlash qobiliyatini aniqlash ularning yod bilan sifat reaksiyasini kuzatishga asoslangan. Tajribani bajarish uchun 5 ta toza probirka olib, har biriga jadvalda ko„rsatilgan miqdorda kraxmal eritmasi, pH 5,6 bufer sistemasi, α- amilaza eritmasi va distillangan suv quyilib, probirkalarga umumiy suyuqlik hajmi 10 ml ga etkaziladi. Probirkalar 40 ᴏ C li suv hammomida ushlanadi. Kraxmalning gidrolizlanish darajasi, 4-probirkadan har 10 minutda shisha tayoqchasi yordamida bir tomchi suyuqlik olib oq chinni yuzasida bir tomchi 1/4000 n yod eritmasidan qo„shish va hosil bo„lgan rangni kuzatish orqali aniqlanadi. Rang qizil-qo„ng„ir bo„lganda (bu probirkada eritrodekstrinlarning hosil bo„lganini bildiradi) probirkalar suv hammomidan olinib, har biriga 2-3 tomchi HCl eritmasi qo„shilib, gidroliz jarayoni to„xtatiladi. So„ngra har bir probirkaga bir necha tomchidan yod eritmasi qo„shib chiqiladi. Probirkalardagi suyuqlik tartib soniga muvofiq kulrangdan boshlab, siyohrang orqali qo„ng„irrang va sariqranglarga bo„yaladi. Probirkalarda hosil bo„lgan ranglar 6.1- jadvalning oxirgi ustuniga yozib olinadi. 26 6.1-jadval Probirka № Kraxmal eritmasi, ml Bufer eritmasi α-amilaza eritmasi, ml Distil. suv, ml Hosil bo„lgan rang 1 5 1 - 4,0 2 5 1 0,2 3,8 3 5 1 0,4 3,6 4 5 1 0,6 3,4 5 5 1 0,8 3,2 6 5 1 1,0 3,0 Probirkalardagi gidroliz mahsulotlari nomlanib, ularning hosil bo„lishiga ta‟sir qilgan omillar haqida xulosa yoziladi. Download 1.1 Mb. Do'stlaringiz bilan baham: 
|