KLİNİK İmmunolojide hastaliğin tanisi iÇİN


Download 446 b.
bet8/11
Sana12.11.2017
Hajmi446 b.
1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11

ÇALIŞMA PRENSİBİ;

  • ÇALIŞMA PRENSİBİ;

  • Fluoresanlanmış (FITC ile) M Ab ile işaretlenmiş hücreler

  • Sıvı bir ortamda sıra halinde uyarıcı ışıktan (Argon lazer) 488nm’de geçirilirler

    •  Uyarıcı ışığı
      •  Hücreler kırarlar veya
      •  Florokromla işaretlenmiş m Ab’lerin bağlandığı hücre tarafından emilir ve yayılır
      •  Bu yayılan ışığın şiddetini ve niteliğini algılayan dedektörler bilgisayara aktarırlar
      •  Buna göre;
      • ♣ Hücrenin tipi ve sayısı belirlenir




KLİNİK KULLANIMI

  • KLİNİK KULLANIMI

    •  Lökosit fenotiplemesi (EN SIK)
      •  Konjenital veya kazanılmış immun yetersizlik tanısı (en sık AIDS)
      • HIV pozitifliğinde prognoz değerlendirilmesi
      •  İmmun yetersiz hastalarda immuniteyi yada kemoterapi monitörizasyonu
      •  KİT yapılan hastalarda yeni immun durumun takibi
    •  Tümör hücre fenotiplemesi
    •  Lösemi ve lenfoma tanı ve sınıflaması
    •  B lenfositlerinde klonal tayini ve lenfoma ve lösemi ayırımında
      •  Hücre içi antijenlerin (myeloperoksidaz miktarı) tayini
    •  Hematopoetik hücrelerin (CD4)
    • Hematopoetik olmayan
    •  Tümörler ve hücrelerden ayırt edilmesi


DNA analizi

  • DNA analizi

    •  Anöploidi tayini
    •  Hücre siklüsu kinetiğinin belirlenmesi
      •  Apoptozis
  • Nötrofil fonksiyon analizleri

    •  O2’nin oluşumunun tayini ile;
    •  Granulomatoz hastalık tayini
  • Diğer kullanım alanları

    •  Retikülosit sayımı
    •  Transplant hastalarında Cross-Match
    •  Sitogenetik


ENFEKSİYON HASTALIKLARINDA

  • ENFEKSİYON HASTALIKLARINDA

    •  Mikroorganizma- hedef hücre ilişkisi;
      • Apoptozisin incelenmesi
        • HIV ile enfekte kişilerde
          • ♣ Monunükleer hücrelerinde apoptosis oranları
          •  CD8 T ve
          •  CD19 B hücrelerinde en sıktır
      •  Konak hücreye ait proteinlerdeki değişimler
        • EBV ile enfekte B lenfositlerinde;
          • ♣ BCR2 ekpresyonu
        • HIV ile enfekte T lenfositlerinde;
          • ♣ CD4 ekpresyonu
        • CMV ile fibroblastlarda;
        • ♣ MHC I ekpresyonu


      •  Mikroorganizmanın hücreye bağlanmasının incelenebilmesi
        • EBV’nin
          • ♣ B lenfositlerine
          • ♣ Epitel hücrelerine
          •  CR2 reseptörüne
        • Poliovirus
          • ♣ MNH CD14 reseptörlerinde
        • Kızamık virusu
          • ♣ Hedef hücrelerin CD46 reseptöründe
      •  Hücre içi ve yüzeyi mikroorganizma antijenlerini inceleme
        • VZV ile enfekte hücre yüzeyinde
        • ♣ gp1
        • HIV ile enfekte CD4 T lenfositlerinde
        • ♣ gp 160/120
        • İnfluenzae ile enfekte hücrelerde
        • ♣ HA antijenileri


    •  Klinik virolojide kullanılmaktadır
      •  Enfekte kişilerin hücrelerinden
        •  Virusle enfekte olanları süratle belirler
          • CMV ile enfekte MNH’ler kantitatif olarak
          • HIV seropozitif kişilerde
          •  MNH’ lerde kantitatif Ag tayini  Böylelikle;
          • *Antiviral tedavinin izlemi
    • Spesifik antikor tayini
      • CMV, HSV, HIV gibi viruslara
      • H. pylori gibi bakterilere
      • T.gondii gibi parazitlere karşı
          •  Gelişen spesifik Ab’ler ölçülebilir


a) Lenfosit izolasyonu

  • a) Lenfosit izolasyonu

  • Dansite- Gradient Santrifüj Yöntemi

    •  Kan hücre grupları birbirinden farklı dansite özelliğine sahiptir
      •  3 ml ficol-isopak (Dansite 1077 gr/lt) konur
      •  3 ml heparinli periferik kan konur
      •  1500 devirde, 45 dakika santrifüj edilir
      •  Lenfositler orta tabakada yoğunlaşırlar
        •  En altta eritrosit ve granülositler
          • ♣ Dansiteleri 1077 ‘den fazla
        •  En üstte buff-coat toplanır
          • ♣ Dansiteleri 1077’den düşük
          • ♣ Buff- Coat’dan
          •  Trombositler (santrifüj)
          •  Monositler petri kabında tutularak uzaklaştırılır


b) Lenfosit ayırımı

  • b) Lenfosit ayırımı

  • T lenfosit ayırımı

    •  Rozet testi
      •  Koyun eritrositlerine karşı CD2 reseptörü vardır
      • Periferik kanda E-Rozet yapan
        •  %65-70 T lenfosit vardır
      •  B lenfositi E-Rozet yapmaz


B lenfosit ayırımı

  • B lenfosit ayırımı

    •  Direkt immun fluoresan yöntemi
      •  Fluoresanlanmış (FITC) anti- Ig Ab ile yapılır
      •  Toplam lenfositlerin %20-25’i B lenfositleridir
  • Periferik kandaki

    •  T ve B lenfosit oranını saptamak
    • İmmun yetmezlik hastalıklarının tanısında
    • Lenfosit lösemi ve lenfomadaki lenfosit tipinin tayininde
    • Otoimmun hastalıklar ve kanserli olgularda hücresel immun yanıtın değerlendirilmesinde kullanılır




  • Do'stlaringiz bilan baham:
1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11


Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2017
ma'muriyatiga murojaat qiling