KLİNİK İmmunolojide hastaliğin tanisi iÇİN


Download 446 b.
bet9/11
Sana12.11.2017
Hajmi446 b.
1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11

NK sitotoksisite ölçümü

  •  Antikora bağımlı hücresel sitotoksisite ölçümü

    •  CR 51 ile işaretlenmiş ve yıkanmış hedef hücrelere
    • Anti- hedef hücre Ig G ile
    •  FcR bulunan effektör hücreler (NK, makrofajlar) eklenir
      •  Hedef hücrelerden CR 51 salınır
      •  Gamma sayacında CR 51 ölçülür
      •  CR 51 miktarı,
      • ♣ NK hücre sayı ve aktivite düzeyi ile doğru orantılıdır


    Lenfosit uyarımı

    • Lenfosit uyarımı

      •  Otoimmunite
      • Kanser patogenezinde
      •  İntraselüler enfeksiyonlarda
      •  Hücresel immun yanıtın ölçümünde uygulanmaktadır
    • Genelde T hücre bazen B hücre yanıtı değerlendirilir

    • Aktive olan T hücreleri

    •  Morfolojik ve fenotipik değişikliğe uğrarlar

      •  Büyüklüğü değişir
      •  Histolojik boyamada kromatik değişiklik
      • Dinlenme halinde olmayan
      •  Ancak; aktive olduğunda ortaya çıkan yüzey proteinleri meydana gelir


    LAT;

    • LAT;

      • Hasta lenfositlerinin
      •  Özgül antijenle
      •  Veya özgül olmayan antijenlerle
      •  İnvitro uyarılmasına dayanır
      •  İki tipi vardır
      • 1)Yüzey fenotipi (aktivasyon belirteçleri) değişikliklerini belirlemek
        •  Aktivasyon belirteçleri
          •  Ya enflamasyon bölgesinden direkt hücrelerden
          •  Ya da invitro uyarılan lenfositlerden aranır
        • ♣ FLOWSİTOMETRİ ile belirlenir


    2) Uyarı sonrası lenfositin proliferasyon yeteneğini ölçmek

      • 2) Uyarı sonrası lenfositin proliferasyon yeteneğini ölçmek
      •  Lenfoblast transformasyon testi (LTT)
        •  96 kuyucuklu plaklarda yapılır
        •  T hücre uyaranları olarak
        •  B hücre uyaranları olarak,
          •  Süperantijenler
          •  LPS kullanılır


    LTT TESTİNDE;

      • LTT TESTİNDE;
        •  Antijen ve lenfositlerin 72 saat kültürü yapılır
        •  H timidin eklenir
        •  H timidin çoğalan DNA yapısına girer
        •  Radyoaktif veya fluoresan boya ile
        •  DNA sentez hızı ve miktarı ölçülür
      • ♣ Hasta ve kontrol karşılaştırmaları ile yorumlanır


     Karışık lenfosit kültürü

      •  Karışık lenfosit kültürü
        •  Alıcı ve verici kanından ayrılan lenfositler
          •  İnvitro besiyerinde karıştırılarak
          •  Lenfosit kültürü yapılır
            • ♣ Antijenik farklılık varsa
            • ♣ Biri diğerini aktive eder
            • ♣ Blastik dönüşümle DNA miktarı artar
            •  DNA sentezinin kantitatif ölçümü yapılır
          •  Bazen verici lenfositleri
            • ♣ X ışınları ile işleme sokulur
            • ♣ Blastik dönüşüm olmaz
            • ♣ Alıcının lenfositleri uyarılır
            • ♣ Alıcının verilecek Dokuya karşı reaksiyon ölçülür
            •  Buna tek yönlü karışık lenfosit kültürü denir
        •  Doku transplantasyonunda
          • * HLA- D (LD antijenleri) antijenleri saptanır
        •  Sitolitik T hücre yanıtının değerlendirilmesinde


    Lenfositotoksik test

      •  Lenfositotoksik test
        •  Test prosedürü
          •  HLA antijeni saptanacak total lenfositler veya CD 19 B lenfosit
          •  Hangi HLA’ya ait olduğu bilinen anti-serum
          •  Kompleman
          •  Tripan mavisi veya eozin boyası
            • ♣ Antijen + antikor birleşir
            • ♣ Kompleman bağlanır
            • ♣ Lenfosit zarı zedelenir
            • ♣ Boya lenfosit içine girer
            • ♣ Mikroskopta %50’den fazla boyanan lenfosit miktarı
            •  Denenen lenfositleri, bilinen anti- HLA tipine ait olduğunu gösterir
        •  Doku transplantasyonunda
          • * HLA A,B,C antijenlerin göstermede kullanılır


    • Sitokin sentezini belirleme testleri

      •  Aktive T hücreler değişik sitokinler üretirler
      •  Enflamasyon bölgesinden elde edilen T lenfositler
        •  İnvitro kültürü yapılır
          •  Total sitokin sentezini verir
        • ELISPOT (Enzimle işaretli immunspot)
        • ELISA ile TH1’lerce sentezlenen gama IFN (Quantiferon) miktarı kantitatif olarak saptanır
        •  Flowsitometrik yöntemle
          •  Tüm farklı sitokin sentezleri ölçülebilir


    M/M Hücreleri

    • M/M Hücreleri

    • Doğal bağışıklıkta rol alırlar

    •  Ve özgül bağışıklığı sitokinlerle koordine ederler

    • Spesifik patojenleri yok eden efektör hücrelerdir

    • Apoptosizde apoptotik hücreleri temizlerler

      •  Bu hücreler doku örnekleri yada hücre süspansiyonlarından MAbs ile saptanırlar
      •  Monositin en iyi belirlenmesi;
      •  FLOWSİTOMETRİDE
        •  Anti, CD14 mAbs ile olur
        •  Ayrıca CD11b, CD11c, CD16, CD32, CD64 gibi taşıdıkları reseptörlerle tanımlanmaları yapılır
      •  Histokimyasal boyama olarak
        •  Non spesifik esteraz Boyaması
          •  Monositer lösemi tanısında kullanılır


    Duyarlı lenfosit ile antijen teması sonucu



    • Do'stlaringiz bilan baham:
    1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11


    Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©fayllar.org 2017
    ma'muriyatiga murojaat qiling